KPNA2在骨肉瘤組織中的表達(dá)情況及對(duì)其骨肉瘤細(xì)胞系增殖影響的研究.pdf

1、背景：
　　核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白α2是核轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的一種，在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中起著重要的作用。研究表明KPNA2在多種腫瘤中表達(dá)，然而目前并無(wú)有關(guān)KPNA2在骨肉瘤中的作用相關(guān)報(bào)道。
　　目的：
　　本實(shí)驗(yàn)研究骨肉瘤細(xì)胞系中和正常組織中KPNA2的蛋白及mRNA的表達(dá)差異。并進(jìn)一步研究KPNA2是否影響骨肉瘤細(xì)胞系Saos-2的增值和凋亡。
　　方法：
　　免疫組化（IHC）用于檢測(cè)骨肉瘤組織和正常骨組織中KPNA2的蛋

2、白的表達(dá)量；實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）用于檢測(cè)四種骨肉瘤細(xì)胞系中KPNA2mRNA表達(dá)水平，小片段RNA干擾慢病毒技術(shù)用于敲減Saos-2中KPNA2的表達(dá)；四唑鹽比色法（MTT）和高內(nèi)涵篩選（HCS）用于檢測(cè)細(xì)胞的增值和生長(zhǎng)；流式細(xì)胞術(shù)用于檢測(cè)細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡。
　　結(jié)果：
　　結(jié)果顯示骨肉瘤組織中 KPNA2高表達(dá)，并且在四種骨肉瘤細(xì)胞系中KPNA2mRNA也高表達(dá)。在轉(zhuǎn)染慢病毒后，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組中細(xì)胞增值率

3、明顯下降，流式結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組中在S期和 G2/M期細(xì)胞數(shù)目明顯增多，表明KPNA2可能干擾Saos-2的細(xì)胞周期和細(xì)胞的生長(zhǎng)。細(xì)胞凋亡的結(jié)果表明KPNA2-shRNA組的凋亡率為13.38±0.48％，明顯高于對(duì)照組（5.13±0.33%）。
　　結(jié)論：
　　該實(shí)驗(yàn)表明，KPNA2在骨肉瘤中高表達(dá)，干擾骨肉瘤細(xì)胞中KPNA2的表達(dá)可抑制Saos-2細(xì)胞的增值，促進(jìn)其凋亡。
　　本課題為山西省重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目“惡性腫瘤發(fā)