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1、Y1406738中山大學(xué)博士學(xué)位論文同源骨肉瘤細(xì)胞系ZOS和ZOS—M的建立鑒定及其骨肉瘤靶點(diǎn)基因的篩選Establishmentandcharacteristicsoftwosyngeneichumanosteosarcomacelllinesandscreeningthetargetgenesofosteosarcoma研究生:鄒昌業(yè)導(dǎo)師:沈靖南教授。l論文答辯委員會主席萬砍、叭一,論文答辯委員會委員:/弛別J、4觚2008年1兮月
2、廣州中山大學(xué)博士學(xué)位論文同源骨肉瘤細(xì)胞系ZOS和ZOSM的建立鑒定及其骨肉瘤靶點(diǎn)基因的篩選結(jié)果ZOS和ZOS—M通過手動刮除成纖維細(xì)胞獲得純化,體外增殖活躍,目前已經(jīng)連續(xù)傳代超過100代,生長穩(wěn)定。鏡下,細(xì)胞呈現(xiàn)聚集性生長,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,核大,具有多個(gè)核分裂相等惡性特征。核型分析發(fā)現(xiàn)非整倍體染色體和多種染色體數(shù)目和結(jié)構(gòu)異常。兩種細(xì)胞的倍增時(shí)間分別為ZOS:3365h,ZOSM:3158h。ZOS和ZOSM均表達(dá)骨鈣素,骨橋蛋白和堿性磷
3、酸酶等成骨性標(biāo)志基因。與傳統(tǒng)的骨肉瘤細(xì)胞系U20S比較,ZOS和ZOSM對氨甲喋呤、阿霉素和順鉑的敏感性均較低。兩種細(xì)胞皮下成瘤率和原位成瘤率均為100%,ZOS不能形成實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移,375%的裸鼠尾靜脈注射ZOS—M后形成肺轉(zhuǎn)移或骨轉(zhuǎn)移。比較ZOS和ZOSM轉(zhuǎn)移相關(guān)基因表達(dá),發(fā)現(xiàn)cadherin1I:i!EZOS—M中的低表達(dá)可能與其高侵襲能力相關(guān)。結(jié)論1ZOS和ZOSM是兩個(gè)新建成的骨肉瘤細(xì)胞系,具有100%皮下和原位成瘤率,是骨肉
4、瘤研究的新模型。2ZOS和ZOSM是從已經(jīng)接受化療的患者取材并建立的骨肉瘤細(xì)胞系,體外實(shí)驗(yàn)證明對當(dāng)前的化療藥物敏感性差,因而是篩選骨肉瘤新藥物的理想工具。3ZOS和ZOS—M分別來源于同一患者的原發(fā)灶和跳躍轉(zhuǎn)移灶,體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)證明ZOSM具有更強(qiáng)的侵襲能力,375%的接種裸鼠可以形成實(shí)驗(yàn)性肺轉(zhuǎn)移或骨轉(zhuǎn)移,因二者具有相同的遺傳背景,所以對二者進(jìn)行對比研究有助于揭示骨肉瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生機(jī)制。這是第一對未經(jīng)長期體外篩選而獲得的具有不同轉(zhuǎn)移能力的同源性
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