2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、該實(shí)驗(yàn)的目的就是對(duì)骨肉瘤進(jìn)行差異基因篩選,力圖找出其特異性或相對(duì)特異性差異表達(dá)基因,為骨肉瘤發(fā)病機(jī)理的研究提供基因水平的理論依據(jù),并為其臨床預(yù)防、早期診斷及基因治療提供新思路.研究對(duì)象為5對(duì)同源性骨肉瘤組織和正常骨組織標(biāo)本,每對(duì)均取自同一骨肉瘤患者之截除肢體.提取標(biāo)本的總RNA,其中的mRNA反轉(zhuǎn)錄合成cDNA第一鏈,再以3種錨定引物和8個(gè)隨機(jī)引物分別組合成的24對(duì)引物,利用經(jīng)反復(fù)改進(jìn)的差異顯示PCR(DD-PCR)技術(shù)對(duì)cDNA進(jìn)行擴(kuò)

2、增,通過測(cè)序膠分離和同位素標(biāo)記物的放射自顯影選取差異條帶,進(jìn)行差異基因篩選(理論上應(yīng)用24對(duì)引物可檢出98﹪以上的差異表達(dá)基因);回收的條帶克隆到T載體上,進(jìn)行測(cè)序和計(jì)算機(jī)分析,并在GenBank檢索確認(rèn)是否為新基因.該實(shí)驗(yàn)采用多對(duì)同源性組織標(biāo)本,挑選差異條帶的交集,這樣既可避免個(gè)體差異因素,又可較為完全地篩出差異基因,得到骨肉瘤普遍存在的特異性差異表達(dá)基因.總之,以骨肉瘤組織和正常骨組織作為研究對(duì)象,運(yùn)用DDRT-PCR技術(shù)獲得骨肉瘤

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