骨肉瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因篩選研究和BLCAP基因克隆、表達及初步功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、結(jié)論: 1.運用基因芯片技術(shù),分析比較兩種具有不同轉(zhuǎn)移能力的骨肉瘤細胞基因表達譜,初步實驗獲得11個差異表達基因,分別參與細胞生長和分化、細胞周期調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導等過程,這些基因在骨肉瘤轉(zhuǎn)移過程中的作用有待深入研究.2.在基因芯片篩選的基礎(chǔ)上,用反義寡核苷酸技術(shù)作進一步篩選,發(fā)現(xiàn)了一個可能具有抑癌基因功能的新基因BLCAP基因.該基因在骨肉瘤中的表達情況及其與骨肉瘤轉(zhuǎn)移的關(guān)系尚未見研究報道.3.運用RT-PCR等分子生物學常規(guī)手段,獲得B

2、LCAP基因ORF,長度為263bp.構(gòu)建了原核細胞表達質(zhì)粒pGEX-4T1-BLCAP和真核細胞表達表達質(zhì)粒pcDNA3.1-BLCAP.4.SDS-PAGE結(jié)果表明,pGEX-4T1-BLCAP轉(zhuǎn)化大腸桿菌,誘導表達GST-BLCAP分子量約為36KD的融合蛋白,為制備抗BLCAP抗體,深入研究BLCAP基因的功能奠定基礎(chǔ).5.用pcDNA3.1-BLCAP進行細胞轉(zhuǎn)染研究,結(jié)果顯示該基因具有抑制骨肉瘤細胞生長速度和增殖活性的作用,

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