HERG1在骨肉瘤細(xì)胞系的表達(dá)及其對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖侵襲的影響.pdf

1、人類(lèi)eag相關(guān)基因（Humanether-a-go-gorelatedgene1，HERG1）鉀離子通道蛋白表達(dá)于多種組織來(lái)源的腫瘤中，由于其與腫瘤細(xì)胞的增殖、凋亡、侵襲等一系列生物學(xué)活性相關(guān)而越來(lái)越受到重視。我實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)HERG1基因在不同惡性程度的骨腫瘤組織有表達(dá)，且表達(dá)水平與腫瘤惡性程度有關(guān)。前期的研究同時(shí)顯示在骨肉瘤細(xì)胞系中HERG1mRNA表達(dá)水平增加。本研究試圖闡明HERG1在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)及其與骨肉瘤細(xì)胞生物學(xué)

2、行為的關(guān)系。
　　目的：本研究旨在探討HERG1在骨肉瘤細(xì)胞系SOSP-9607和MG-63中的表達(dá)情況，并通過(guò)抑制HERG1的表達(dá)研究其對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖和侵襲能力的影響。
　　方法：（1）采用免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光和Westernblot的方法研究HERG1在骨肉瘤細(xì)胞系SOSP-9607和MG-63中的表達(dá)情況；（2）構(gòu)建針對(duì)HERG1的shRNA穩(wěn)定表達(dá)載體，并轉(zhuǎn)染骨肉瘤細(xì)胞系，建立穩(wěn)定抑制HERG1表達(dá)的骨肉瘤細(xì)胞系

3、；（3）運(yùn)用CCK-8檢測(cè)抑制HERG1表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖能力的影響；（4）運(yùn)用Transwell檢測(cè)抑制HERG1表達(dá)對(duì)骨肉瘤細(xì)胞侵襲能力的影響。
　　結(jié)果：（1）免疫細(xì)胞化學(xué)、免疫熒光和Westernblot結(jié)果顯示HERG1在兩株骨肉瘤細(xì)胞中呈陽(yáng)性表達(dá)；（2）成功構(gòu)建針對(duì)HERG1的shRNA真核表達(dá)載體；（3）成功建立穩(wěn)定表達(dá)HERG1-shRNA的細(xì)胞系，并篩選出抑制HERG1表達(dá)最高的細(xì)胞株；（4）CCK-8檢測(cè)結(jié)果