H19 在多形性膠質母細胞瘤中的表達及其對細胞系增殖、侵襲的影響.pdf

1、【研究目的】：
　　1.探討H19在多形性膠質母細胞瘤（glioblastoma multiforme,GBM）中的表達情況；
　　2.初步闡明H19在GBM中表達對細胞增殖、侵襲及凋亡的影響，為GBM的基因靶向治療提供循證學依據。
　　【研究方法】：
　　【1】實時熒光定量核酸擴增（Polymerase chain reaction,qPCR)檢測H19在GBM和正常細胞的表達；
　　【2】CCK-8試劑

2、盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）檢測GBM U87細胞增殖；
　　【3】流式細胞技術（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）檢測GBM U87細胞凋亡及GBM U87細胞S周期；
　　【4】侵襲小室( Transwell)檢測GBM U87細胞遷移和侵襲；
　　【5】蛋白質印跡法(Western blot)法檢測P53表達。
　　【6】選擇統(tǒng)計軟件包SPSS13.0對各組實驗數(shù)據做統(tǒng)計學的

3、分析。
　　【研究結果】：
　　【1】qPCR檢測H19在GBM和正常細胞表達顯示：H19在GBM較正常組織呈高表達。
　　【2】CCK-8檢測U87 GBM增殖：H19過表達的U87 GBM細胞增殖24h、48h較對照組細胞（U87-MG、U87-GFP）的增殖明顯增高。
　　【3】流式細胞技術檢測U87細胞凋亡及細胞周期：H19過表達降低GBM細胞凋亡率、增高S期細胞比例。
　　【4】侵襲小室檢測U87

4、細胞遷移及侵襲：H19過表達的U87GBM細胞的遷移增高、侵襲率增加。
　　【5】 Western blot法檢測P53表達：H19過表達的U87GBM細胞的P53的表達較對照組細胞明顯抑制。
　　【結論】：
　　【1】H19在GBM呈高表達。
　　【2】H19減少了GBM細胞凋亡率、增加GBM細胞遷移率、增加GBM細胞侵襲率、增加GBM細胞周期s期比例。
　　【3】H19抑制P53的表達。
　　【4