MicroRNA218在膠質(zhì)瘤中的表達及對膠質(zhì)瘤細胞遷移與侵襲的影響.pdf

1、背景和目的：
　　中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中腦腫瘤占90％，其中膠質(zhì)瘤是最常見的腦腫瘤。膠質(zhì)瘤細胞具有高度的侵襲、遷移及增殖能力。然而，促進腫瘤進展和復(fù)發(fā)的分子機制仍不確定。因此，治療腫瘤的方法和藥物非常有限，且多數(shù)患者的中位生存率不足1年，膠質(zhì)母細胞瘤患者的臨床生存率則更低。因而，探索膠質(zhì)瘤細胞遷移及侵襲的分子機制是極有臨床意義的，可以促進更有效的治療手段或藥物的研發(fā)。MicroRNAs是一類18至25個核苷酸長度的非編碼單鏈的小RNA

2、s，通過調(diào)控特定的有活性的mRNA靶點，可在惡性腫瘤的進展過程起重要作用。超過半數(shù)的人類基因由microRNA調(diào)控轉(zhuǎn)錄抑制和（或）mRNA降解來調(diào)控。MicroRNAs也參與腫瘤細胞的凋亡、增殖、遷移及侵襲的調(diào)控。研究表明，microRNA與腫瘤的發(fā)生有密切關(guān)系，并可分為致癌microRNA和抑癌microRNA。MicroRNA218為抑癌microRNA。近年來，MicroRNA218在一些腫瘤中已廣泛被研究，研究表明其在腦膠質(zhì)瘤細

3、胞中顯著表達下調(diào)。然而，MicroRNA218對膠質(zhì)瘤細胞的遷移和侵襲的生物學(xué)影響知之甚少。本研究旨在探討microRNA218在腦膠質(zhì)瘤組織樣本中的表達水平與病理分級的相關(guān)性，以及microRNA218的生物學(xué)功能。
　　方法：
　?。?）收集經(jīng)病理確診的不同級別膠質(zhì)瘤的新鮮組織樣本38例，用液氮罐轉(zhuǎn)運至﹣80℃冰箱，用于總RNA的提取。
　　（2）應(yīng)用定量RT-PCR檢測miRNA218在各腦膠質(zhì)瘤組織樣本中的表達

4、水平，并分析其與膠質(zhì)瘤病理分級的相關(guān)性。
　?。?）應(yīng)用脂質(zhì)體2000將pcDNA3.1-microRNA218質(zhì)粒轉(zhuǎn)染膠質(zhì)瘤細胞U87、U251。
　?。?）使用細胞計數(shù)試劑盒-8（CCK-8）細胞計數(shù)法檢測microRNA218對膠質(zhì)瘤細胞U87、U251存活率的影響。
　?。?）應(yīng)用Transwell侵襲實驗檢測microRNA218對膠質(zhì)瘤細胞U87的侵襲能力的影響。
　?。?）應(yīng)用細胞劃痕實驗測定mic

5、roRNA218對膠質(zhì)瘤細胞U87的遷移能力的影響。
　　結(jié)果：
　　(1)MicroRNA218在WHOI-II膠質(zhì)瘤患者中的表達水平明顯高于WHOIII-IV患者，且microRNA218的表達水平與腦膠質(zhì)瘤病理分級呈負相關(guān)。
　　(2)MicroRNA218抑制U87MG和U251MG細胞增殖能力。
　　(3)MicroRNA218體外抑制膠質(zhì)瘤細胞U87遷移與侵襲能力。
　　結(jié)論：
　　(1)