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文檔簡介
1、目的:研究Rap2A對腦膠質(zhì)瘤細胞侵襲及遷移的影響,為腦膠質(zhì)瘤治療提供理論和實驗數(shù)據(jù)。
方法:1.通過WB(免疫印跡)檢側(cè)Rap2A的不同突變體(WT-Rap2A,DA-Rap2A,DN-Rap2A)的轉(zhuǎn)染效果:2通過劃痕實驗檢測過表達Rap2A的不同突變體24h后膠質(zhì)瘤U251和U87細胞遷移的變化;3.通過Transwell侵襲實驗檢測細胞在過表達Rap2A的不同突變體48h后膠質(zhì)瘤U251,U87細胞侵襲能力的改變;4.
2、通過WB檢測轉(zhuǎn)染Rap2A的不同突變體48h后PARG1和AKT的活性表達變化。
結(jié)果:1.Rap2A不同突變體的轉(zhuǎn)染效率均達70%-80%;2劃痕實驗結(jié)果顯示:在人腦膠質(zhì)瘤細胞U251和U87中,突變體DN-Rap2A組遷移細胞數(shù)目明顯高于對照組,而DA-Rap2A,WT-Rap2A組遷移細胞數(shù)目明顯低于對照組(*P<0.05)3.Transwell實驗發(fā)現(xiàn)在人腦膠質(zhì)瘤U251,U87中,突變體DN-Rap2A組侵襲數(shù)目明顯
3、高于對照組,而DA-Rap2A、WT-Rap2A組侵襲細胞數(shù)目明顯低于對照組(*P<0.05)4.轉(zhuǎn)染Rap2A的不同突變體48h后,WB結(jié)果顯示:與對照組相比,DN-Rap2A組的PARG1的蛋白水平和AKT活性明顯升高(**P<0.01),而WT-Rap2A DA-Rap2A組則明顯下降(**P<0.01)。
結(jié)論:1.活性形式的Rap2A能夠抑制腦膠質(zhì)瘤細胞的侵襲與遷移。2.Rap2A可能通過調(diào)節(jié)PARG1的水平進而影響
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