NEDD4-1對(duì)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲的影響及機(jī)制研究.pdf

1、一一一一———————————————————————————————一目錄縮略詞表l中文摘要2英文摘要4jL—1一刖吾“6材料和方法81材料82方法13結(jié)果25討論29結(jié)論33論文圖片34參考文獻(xiàn)45綜述45攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文題目56臨床培訓(xùn)小結(jié)57致謝59論文聲明6l論文審閱認(rèn)定書62卜j■?！駀l徐州醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文NEDD41對(duì)腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲的影響及機(jī)制研究中文摘要目的檢測(cè)NEDD41、CNrasGEF在正常人腦組

2、織和腦膠質(zhì)瘤不同病理級(jí)別中的表達(dá)，并分析它們之間的相關(guān)關(guān)系；研究NEDD41對(duì)腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞侵襲性的影響及機(jī)制。方法l、收集臨床手術(shù)標(biāo)本，分為正常腦組織組、膠質(zhì)瘤高分化組(II級(jí)組)和低分化組(III級(jí)組)，應(yīng)用RTPCR法檢測(cè)6例人腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本和3例正常腦組織中的NEDD41和CNrasGEF的mRNA水平；應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)29例腦膠質(zhì)瘤組織標(biāo)本和6例正常腦組織標(biāo)本中NEDD41和CNrasGEF蛋白表達(dá)情況，并分析二者

3、之間的相關(guān)性。2、在U251膠質(zhì)瘤細(xì)胞中過(guò)表達(dá)NEDD41或用siRNA下調(diào)NEDD41的表達(dá)，分別采用RTPCR、Westernblot檢測(cè)NEDD41mRNA水平及其蛋白含量，鑒定轉(zhuǎn)染效果；利用Transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力。3、分別采用RTPCR、Westernblot檢測(cè)過(guò)表達(dá)或下調(diào)NEDD41后的CNrasGEFmRNA水平及其蛋白含量，并分析二者之間的相關(guān)性。結(jié)果1RTPCR結(jié)果顯示，NEDD41mRNA和CNra

4、sGEFmRNA在腦膠質(zhì)瘤和正常腦組織中均有表達(dá)，其中腦膠質(zhì)瘤的NEDD41mRNA水平明顯高于正常腦組織(氏O05)；但兩組CNrasGEFmRNA水平未見明顯差別(胗O05)。2免疫組化結(jié)果顯示，NEDD41的陽(yáng)性表達(dá)定位于細(xì)胞核和(或)細(xì)胞漿，CNrasGEF陽(yáng)性表達(dá)也定位于細(xì)胞核和(或)細(xì)胞漿。膠質(zhì)瘤組織中NEDD41蛋白高于正常腦組織，而CNrasGEF的蛋白表達(dá)低于正常腦組織。NEDD41蛋白水平隨腫瘤級(jí)別的增高而增加(尸D