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1、目的：檢測(cè)并研究Bmi-1對(duì)U251及U87神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移、侵襲及增殖的影響并探討其作用機(jī)制，為膠質(zhì)瘤的基因治療提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法：1.通過WB檢測(cè)針對(duì)人Bmi-1基因特異性的siRNA oligo對(duì)Bmi-1基因的干擾效果;2.通過劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞在基因沉默Bmi-124h、48h后U251及U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移的變化;3.通過Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞在基因沉默Bmi-148h后U251及U87膠質(zhì)瘤細(xì)
2、胞侵襲能力的變化;4.通過Edu增殖實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞在基因沉默Bmi-148h后U251及U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖能力的變化;5.通過WB實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞在基因沉默Bmi-148h后p16、AKT及p-AKT表達(dá)的變化。
結(jié)果：1.針對(duì)Bmi-1特異性siRNA oligo干擾效率達(dá)70％-80％(P＜0.01);2.劃痕實(shí)驗(yàn)證實(shí)轉(zhuǎn)染siRNA oligo24小時(shí)、48小時(shí)后細(xì)胞遷移數(shù)目明顯低于對(duì)照組(P＜0.01、P＜0.05);3.T
3、ranswell侵襲實(shí)驗(yàn)證實(shí)轉(zhuǎn)染siRNA oligo48h后細(xì)胞侵襲數(shù)目明顯低于對(duì)照組(P＜0.01);4.Edu實(shí)驗(yàn)證實(shí)轉(zhuǎn)染siRNA oligo48h后U87及U251細(xì)胞增殖數(shù)目明顯低于對(duì)照組(P＜0.01);5.WB檢測(cè)到干擾Bmi-1基因后48h p16升高明顯，p-AKT下降明顯，與對(duì)照組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.01、P＜0.05)。
結(jié)論：1.Bmi-1基因可以增強(qiáng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移、侵襲及增殖能力;2.Bmi
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