半乳凝素-9對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和遷移能力的影響及其機(jī)制研究.pdf

1、背景：半乳凝素-9(galectin-9)，是一種起源于T淋巴細(xì)胞的具有嗜酸性粒細(xì)胞趨化作用的因子，最早在活化的T淋巴細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，隨后在多種正常人體組織中發(fā)現(xiàn)galectin-9的存在，具有多種生物學(xué)功能如細(xì)胞聚集、粘附、增殖、凋亡及炎性調(diào)節(jié)，并且首次在霍奇金淋巴瘤組織中發(fā)現(xiàn)其存在，至今已在多種腫瘤組織如乳腺癌、結(jié)腸癌、胃癌等發(fā)現(xiàn)galectin-9的表達(dá)并在多種不同方面影響腫瘤生物學(xué)行為。Galecin-9在膠質(zhì)瘤中的是否存在及其作用

2、報(bào)道少見(jiàn)，我們研究其在膠質(zhì)瘤中可能的作用。
　　目的：研究外源性半乳凝素-9(galectin-9)對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系U251增殖和遷移能力的影響，在galectin-9作用同時(shí)觀察乳糖的加入對(duì)該作用的影響，并探討其作用機(jī)制。
　　方法：利用實(shí)時(shí)定量PCR方法檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中g(shù)alectin-9的表達(dá)情況;選取代表性細(xì)胞系U251進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)，在U251細(xì)胞培養(yǎng)基中加入不同濃度(1、4、8、16ug/ml)外源性galect

3、in-9蛋白處理一定時(shí)間(12、24、36h)后，使用細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒CCK-8檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖能力的變化，使用transwell實(shí)驗(yàn)檢測(cè)膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移能力的變化;另外在galectin-9處理細(xì)胞的同時(shí)加入其競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑乳糖，再使用同樣方法檢測(cè)增殖和遷移能力，觀察乳糖能否影響galectin-9對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系的作用。
　　結(jié)果：PCR結(jié)果顯示4種膠質(zhì)瘤細(xì)胞系均極低水平表達(dá)galectin-9，其中U251細(xì)胞系幾乎不表達(dá)gale

4、ctin-9。在增殖試驗(yàn)中，被高濃度galectin-9(8、16ug/ml)處理組的細(xì)胞增殖率較空白對(duì)照組明顯降低(P＜0.001); U251細(xì)胞在同一濃度galectin-9處理時(shí)，隨著時(shí)間延長(zhǎng)，不同時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞增殖率逐漸降低(P＜0.01);在相同濃度galectin-9處理的基礎(chǔ)上，添加乳糖組細(xì)胞增殖率相對(duì)于未加乳糖組增高(P＜0.05）。在遷移試驗(yàn)中，外源性galectin-9刺激U251細(xì)胞一定時(shí)間后，統(tǒng)計(jì)穿至膜下的細(xì)胞數(shù)