內(nèi)皮抑素對膠質(zhì)瘤細胞增殖的影響研究.pdf

1、腦膠質(zhì)瘤來源于神經(jīng)上皮，是顱內(nèi)最常見的原發(fā)性腫瘤，具有發(fā)病率高、復發(fā)率高、死亡率高和治愈率低的特點。目前技術條件下，腦膠質(zhì)瘤特別是惡性程度高的腦膠質(zhì)瘤的預后還很不理想。而腫瘤的抗血管生成治療越來越引起人們的普遍關注，抗血管生成治療是通過抑制血管的生成而阻斷腫瘤細胞獲得營養(yǎng)，從而達到有效抑制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的目的。重組人血管內(nèi)皮抑素（下文簡稱內(nèi)皮抑素，endostatin）是目前臨床效果比較好的一種抗腫瘤藥，臨床上主要用于初治或復治的Ⅲ/Ⅳ

2、期非小細胞肺癌的治療，但是對腦膠質(zhì)瘤的治療效果怎么樣，目前還不是很清楚。故本實驗擬通過研究內(nèi)皮抑素對體外培養(yǎng)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株增殖作用及VEGF和核仁素表達的影響，進一步為腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤的臨床治療提供新的途徑和理論依據(jù)。
　　 第一部分，內(nèi)皮抑素對膠質(zhì)瘤細胞增殖的抑制作用
　　 目的：研究內(nèi)皮抑素對神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株U251和C6增殖及遷移是否有抑制作用，并探討它對神經(jīng)膠質(zhì)瘤的治療及意義。
　　 方法：體外培養(yǎng)神經(jīng)膠

3、質(zhì)瘤細胞株U251和C6，不同濃度內(nèi)皮抑素(10、20、30、40、50μg/ml)分別處理細胞48h，MTT法檢測不同濃度內(nèi)皮抑素對U251和C6的增殖作用的影響；20μg/ml內(nèi)皮抑素作用細胞24、48h后，觀察對細胞遷移作用的影響及細胞的形態(tài)學變化。
　　 結(jié)果：不同濃度內(nèi)皮抑素對U251和C6細胞的增殖均有不同程度的抑制作用并有濃度依賴性，最后選取20μg/ml作為內(nèi)皮抑素后續(xù)的實驗濃度。另外，內(nèi)皮抑素對U251和C6細

4、胞的遷移能力也有顯著抑制作用。
　　 結(jié)論：內(nèi)皮抑素對體外培養(yǎng)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞株的增殖及遷移均有抑制作用。
　　 第二部分，內(nèi)皮抑素對膠質(zhì)瘤細胞VEGF和核仁素表達變化的影響
　　 目的：研究內(nèi)皮抑素對U251和C6細胞中VEGF及核仁素表達變化，從而為內(nèi)皮抑素對腫瘤的臨床治療提供實驗基礎和科學的理論依據(jù)。
　　 方法：用免疫熒光標記檢測U251和C6細胞中VEGF和核仁素蛋白表達以及20μg/ml內(nèi)皮抑

5、素分別處理U251和C6細胞24h和48h時VEGF表達變化；Western blot檢測兩種細胞在內(nèi)皮抑素處理不同時間核仁素蛋白表達變化。
　　 結(jié)果：VEGF在兩種細胞中都高表達，主要分布在包漿中；核仁素在兩種細胞中也都有表達，主要表達在細胞核中，少量表達在胞漿和細胞膜上。內(nèi)皮抑素可以下調(diào)U251和C6細胞中VRGF表達；而核仁素的表達則呈現(xiàn)先減少后增多的趨勢。
　　 結(jié)論：在體外內(nèi)皮抑素可以下調(diào)膠質(zhì)瘤細胞VEGF表