紫草素和拓撲替康抑制膠質(zhì)瘤干細胞增殖的機制研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學碩士學位論文紫草素和拓撲替康抑制膠質(zhì)瘤干細胞增殖的機制研究姓名：張峰磊申請學位級別：碩士專業(yè)：生物學；神經(jīng)生物學指導教師：薛一雪201205表達促進凋亡，以及是否對G S C s 的細胞周期產(chǎn)生阻滯作用，從而抑制G S C s 增殖。本研究有望為T o p oI 抑制劑對腦膠質(zhì)瘤的治療提供新的理論和實驗依據(jù)。實驗材料和方法一、實驗材料( 一) 實驗細胞株人U 2 5 1 膠質(zhì)瘤細胞株和人U 8 7 膠質(zhì)母細胞瘤細胞株均購自南

2、京凱基生物科技發(fā)展有限公司。( 二) 主要試劑紫草素( 中國藥品生物制品檢定所) ；M T T ，D M S O ，拓撲替康( 美國S i g m a公司) ，D M E M ／F ．1 2 培養(yǎng)基( 美國H y C l o n e 公司) ；胎牛血清( 天津灝洋生物科技有限公司) ；A n n e x i n V ／P I 細胞凋亡檢測試劑盒( 北京寶賽生物技術(shù)有限公司) ；細胞周期檢測試劑盒( 南京凱基生物科技有限公司) ；小鼠抗C

3、 D l 3 3 單克隆抗體，兔抗N e s t i n g 多克隆抗體( P r o d u c t D e s c r i p t i o n 公司) ；小鼠抗1 3 - t u b u l i n 單克隆抗體，兔抗G F A P 多克隆抗體( A b e a m 公司) ，小鼠抗拓撲異構(gòu)酶單克隆抗體，兔抗B c l ．2多克隆抗體，小鼠抗1 3 ．a(chǎn) c t i n 單克隆抗體，增強化學發(fā)光法試劑盒( 美國S a n t a C

4、r u z公司) ；山羊抗兔H R P 標記的I g G 二抗，山羊抗小鼠H R P 標記的I g G 二抗，山羊抗小鼠F I T C 標記的I g G 二抗，山羊抗兔C Y 3 標記的I g G 二抗( 北京中山生物技術(shù)公司) 。( 三) 主要儀器細胞培養(yǎng)箱( 美國F o r m as c i e n t i f i c 公司) ；超凈工作臺( 蘇州安泰空氣技術(shù)有限公司) ；倒置顯微鏡( 日本T M S 公司) ；紫外．可見光分光光度

5、計( 日本島津公司) ；B D F A C S C a l i b u r 流式細胞儀( 美國B e c t o n ．D i c k i n s o n 公司) ；超聲粉碎機( 德國D r ．H i e l s c h e r 公司) ；臺式低溫超速離心機( 德國S i g m a 公司) ；聚丙烯酰胺凝膠電泳裝置( 美國B i o —R a d 公司) ；轉(zhuǎn)印儀( 北京市六一儀器廠) ；L a s 3 0 0 0 成像系統(tǒng)( 日本F