2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:觀察過表達(dá)miR-195對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系SHG-44增殖的影響,并探討其調(diào)控SHG-44增殖能力的機(jī)制。
  方法:利用脂質(zhì)體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR-195mimics入人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系SHG-44,同時(shí)設(shè)立空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組,流式細(xì)胞儀檢測(cè)轉(zhuǎn)染效率,實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后miR-195的表達(dá)變化。分別從體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)兩方面研究miR-195對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞系SHG-44增殖的影響。體外實(shí)驗(yàn)通過CCK-8法檢測(cè)轉(zhuǎn)染

2、前后SHG-44細(xì)胞增殖能力的變化,使用流式細(xì)胞儀分析各組細(xì)胞周期的分布。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)通過構(gòu)建裸鼠皮下膠質(zhì)瘤模型,觀察過表達(dá)miR-195對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞成瘤能力的影響,記錄三組裸鼠腫瘤生長(zhǎng)的體積變化,繪制生長(zhǎng)曲線,剝離瘤體后稱重,進(jìn)行組織HE染色,通過免疫組化染色檢測(cè)Ki-67在瘤體中的表達(dá)變化。
  結(jié)果:1、流式細(xì)胞儀檢測(cè)示miR-195mimics與無義序列轉(zhuǎn)染率均達(dá)到90%以上;
  2、實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染

3、后miR-195的表達(dá)水平明顯升高,與空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組比較升高約有6倍;3、細(xì)胞增殖能力通過CCK-8法檢測(cè),經(jīng)過轉(zhuǎn)染miR-195mimics后細(xì)胞的增殖能力顯著下降,生長(zhǎng)受到明顯抑制;4、過表達(dá)miR-195后,細(xì)胞的周期分布發(fā)生變化,G0/G1期細(xì)胞數(shù)量增多,S期細(xì)胞數(shù)量減少,G0/G1期向S期轉(zhuǎn)換受到阻滯;5、裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)顯示,三組裸鼠成瘤率達(dá)到100%,miR-195組與其他兩組比較,瘤體生長(zhǎng)速度減慢,瘤體體積減小、重量

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