GRM5在人膠質(zhì)瘤中表達及其與膠質(zhì)瘤U251細胞遷移及侵襲能力關(guān)系的研究.pdf

1、研究目的：
　　1.研究GRM5（代謝性谷氨酸受體5）在膠質(zhì)瘤表達與膠質(zhì)瘤病理級別的相關(guān)性；
　　2.研究GRM5對膠質(zhì)瘤U251細胞的遷移及侵襲能力的影響。
　　研究方法：
　　1.為了研究膠質(zhì)瘤組織中GRM5表達情況，我們收集了本院神經(jīng)外科13例膠質(zhì)瘤標本，所有標本均依據(jù)2007年世界衛(wèi)生組織（World Health Origanization,WHO）中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類標準進行病理診斷并分級。應(yīng)用免疫組

2、化的方法檢測膠質(zhì)瘤標本中GRM5的表達情況。
　　2.為了研究GRM5對膠質(zhì)瘤U251細胞的遷移能力的影響，我們設(shè)計合成了2條特異性針對人GRM5基因的小分子干擾RNA(GRM5-siRNA-1247，GRM5-siRNA-1587),及對照RNA(GRM5-siRNA-NC);轉(zhuǎn)染U251細胞株48h后用Western blot（蛋白質(zhì)印跡法）檢測GRM5的表達情況；
　　3.用轉(zhuǎn)染后的U251細胞做劃痕實驗和 Tansw

3、ell實驗，驗證轉(zhuǎn)染小分子RNA(GRM5-siRNA-1247，GRM5-siRNA-1587)，干擾GRM5表達后U251細胞的遷移和侵襲能力的影響。
　　實驗結(jié)果：
　　1.免疫組化結(jié)果顯示GRM5在人低級別和高級別膠質(zhì)瘤中均有表達，且隨腫瘤級別增高，表達量也增高，結(jié)果具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。
　　2.Western Blot實驗結(jié)果顯示U251細胞轉(zhuǎn)染小分子干擾RNA(GRM5-siRNA-1247)后

4、GRM5表達量明顯降低，差異具有統(tǒng)計學意義（t=3.020,P＜0.05）。
　　3.劃痕實驗結(jié)果顯示U251細胞轉(zhuǎn)染小分子干擾RNA(GRM5-siRNA-1247)后，細胞劃痕傷口愈合率明顯低于對照組，差異具有統(tǒng)計學意義（24h t=6.751,P＜0.01;48h t=8.668 P＜0.01）。
　　4.Tanswell實驗結(jié)果顯示U251細胞轉(zhuǎn)染小分子干擾RNA(GRM5-siRNA-1247)后，細胞侵襲能力明顯