STAT3在膠質瘤U251細胞中的表達及轉染SiRNA-STAT3后對U251細胞的影響.pdf

1、目的：探討STAT3在膠質瘤U251細胞中的表達情況及在U251細胞中導入SiRNA-STAT3后STAT3以及與STAT3相關的P53、P21、Cyclin A、Cyclin E的表達趨勢和細胞的生長情況，進一步探討STAT3對膠質瘤U251細胞周期的影響以及可能的機制。
　　方法：通過免疫組化（SP）法，檢測膠質瘤組織中STAT3的表達情況，后將SiRNA-STAT3轉染入膠質瘤U251細胞后，利用Western blot檢測

2、轉染前后膠質瘤U251細胞中STAT3的表達情況，對轉染后的細胞通過MTT法檢測細胞的增殖活性，用劃痕實驗檢測轉染后細胞的遷移情況。最后用Western blot檢測轉染前后細胞內P53、P21、Cyclin A、Cyclin E蛋白的表達情況以及變化趨勢。
　　結果：1.免疫組化結果顯示：膠質瘤組織中STAT3呈現高表達。2.Western blot結果顯示：SiRNA-STAT3轉染前后STAT3的表達情況與空白組（Mock組

3、）、空載組相比較，SiRNA-STAT3組的STAT3的表達在轉染后明顯降低，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而Mock組和空載組之間差異無統(tǒng)計學意義。轉染后P53、P21蛋白表達增強，而Cyclin A、Cyclin E蛋白表達減弱，SiRNA-STAT3組與Mock組及空載組相比差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），Mock組和空載組之間差異無統(tǒng)計學意義。3.MTT結果顯示：與空載組和Mock組相比，SiRNA-STAT3組細胞增殖明

4、顯減慢（P<0.05）。4.劃痕實驗結果顯示：劃痕24h后，Mock組細胞就已經遷移越過劃痕范圍，空載組遷移能力較正常細胞略差，而SiRNA-STAT3組進入空白處的細胞明顯減少，細胞遷移能力受到抑制。
　　結論：1.通過轉染獲得低表達或不表達STAT3的U251細胞模型，STAT3表達下降會抑制膠質瘤U251細胞增殖，并使P21、P53在蛋白水平表達增高；Cyclin A、CyclinE在蛋白水平表達降低。2.通過轉染膠質瘤U2