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文檔簡介
1、目的:骨肉瘤是最常見的惡性骨腫瘤,骨肉瘤患者的長期生存取決于如何預(yù)防和治療。本課題旨在探討過氧化物酶體增殖活化受體γ(Peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)沉默對骨肉瘤MG-63細(xì)胞增殖的影響;并初步探討其可能的分子機(jī)制。
方法:1)本研究以骨肉瘤MG-63細(xì)胞作為研究對象,應(yīng)用Lipofectamine2000將shRNA-PPARγ(干擾質(zhì)粒),shRNA-sc
2、ramble(陰性對照質(zhì)粒)轉(zhuǎn)染入骨肉瘤MG-63細(xì)胞中,采用Western blot檢測未轉(zhuǎn)染組、shRNA-scramble質(zhì)粒組、shRNA-PPARγ質(zhì)粒組三組中PPARγ的表達(dá);2)MTT法觀察PPARγ沉默對骨肉瘤MG-63細(xì)胞增殖的影響;克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測PPARγ沉默對骨肉瘤MG-63細(xì)胞克隆形成能力的影響;3)Western Blot檢測PPARγ沉默后對骨肉瘤MG-63細(xì)胞中細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白p-AKT、p-GSK-3β
3、、CyclinD1的蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:
1. PPARγ在骨肉瘤MG-63細(xì)胞中沉默成功。
2.MTT及克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示PPARγ沉默可促進(jìn)骨肉瘤MG-63細(xì)胞的增殖。
3.Western Blot檢測結(jié)果顯示PPARγ沉默上調(diào)骨肉瘤MG-63細(xì)胞中p-AKT、p-GSK-3β、CyclinD1蛋白的表達(dá)。
結(jié)論:
1. PPARγ在骨肉瘤MG-63細(xì)胞中沉默成功,PP
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