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文檔簡介
1、目的:探討miRNA125b對(duì)順鉑抑制骨肉瘤MG-63細(xì)胞增殖的影響。
方法:
1、MTT法檢測在不同濃度順鉑的干預(yù)下骨肉瘤MG-63細(xì)胞的增殖情況。
2、將骨肉瘤MG-63細(xì)胞分為實(shí)驗(yàn)組(順鉑干預(yù))與對(duì)照組(順鉑未干預(yù))兩組,分別檢測其miRNA125b表達(dá)情況。
3、對(duì)miRNA125b在骨肉瘤MG-63細(xì)胞進(jìn)行沉默及過表達(dá),分為miRNA125b mimic, miRNA125b inhib
2、itor, miRNA125b NC,miRNA125b inhibitor NC四組,進(jìn)行IC50濃度的順鉑干預(yù)下的MTT實(shí)驗(yàn),檢測骨肉瘤MG-63細(xì)胞的增殖情況。
結(jié)果:
1、在進(jìn)行了多次順鉑干預(yù)下的MTT實(shí)驗(yàn)后,可以發(fā)現(xiàn)隨著順鉑濃度增大,對(duì)骨肉瘤MG-63細(xì)胞的抑制率增大。通過IC50計(jì)算軟件,得到順鉑抑制骨肉瘤MG-63細(xì)胞增殖的半數(shù)致死濃度IC50=26.73。
2、IC500濃度的順鉑干預(yù)與未干
3、預(yù)的骨肉瘤MG-63細(xì)胞孵育48小時(shí)后檢測miRNA125b表達(dá)情況,得到干預(yù)組miRNA125b表達(dá)比率(實(shí)驗(yàn)組/對(duì)照組)=0.312??梢钥吹皆陧樸K干預(yù)下的骨肉瘤MG-63細(xì)胞中miRNA125b相對(duì)于未干預(yù)的表達(dá)下調(diào)。
3、在酶聯(lián)免疫檢測儀OD490nm處測量各孔的吸光值,計(jì)算抑制率。我們可以得到miRNA125b inhibitor組抑制率較miRNA125binhibitor NC組降低,miRNA125b mimi
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