TK-GCV系統(tǒng)對骨肉瘤MG-63細(xì)胞殺傷的體外實驗研究.pdf

1、目的
　　探討脂質(zhì)體介導(dǎo)的TK/GCV系統(tǒng)對人骨肉瘤MG-63細(xì)胞的殺傷作用及其所產(chǎn)生的“旁觀者效應(yīng)”。
　　方法
　　脂質(zhì)體介導(dǎo)TK基因體外轉(zhuǎn)染骨肉瘤MG-63細(xì)胞，倒置熒光顯微鏡觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染是否成功，流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染細(xì)胞與未轉(zhuǎn)染細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。將未轉(zhuǎn)染的骨肉瘤MG-63細(xì)胞分為3組，實驗組1用轉(zhuǎn)染TK/GCV的細(xì)胞上清液按1/10，1/7，1/5，1/2比例與培養(yǎng)液的混和液培養(yǎng)，實驗組2用經(jīng)0.22μm濾器過濾的

2、轉(zhuǎn)染后細(xì)胞上清液按1/10，1/7，1/5，1/2比例與培養(yǎng)液的混和液培養(yǎng)，對照組用培養(yǎng)液培養(yǎng)，四甲基偶氮唑鹽（MTT）比色法分別測定各組細(xì)胞的生長抑制率、骨肉瘤細(xì)胞對TK/GCV系統(tǒng)的敏感性以及轉(zhuǎn)染細(xì)胞的旁觀者效應(yīng)。
　　結(jié)果
　　1、經(jīng)TK基因轉(zhuǎn)染的MG-63細(xì)胞，倒置熒光顯微鏡下有大量綠色熒光蛋白表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測轉(zhuǎn)染TK基因的細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率可達(dá)75.5％。
　　2、6天后MTT檢測結(jié)果顯示實驗組1中各比例濃度的