姜黃素上調(diào)miR-124抑制人骨肉瘤細(xì)胞MG-63增殖和侵襲的機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究姜黃素調(diào)控的miR-124（Homo sapiens miR-124）改變?cè)谝种迫斯侨饬黾?xì)胞MG-63增殖和侵襲中發(fā)揮的作用及其機(jī)制。
　　方法：通過(guò)qRT-PCR的方法，分別檢測(cè)人骨肉瘤細(xì)胞株MG-63（姜黃素處理組和DMSO對(duì)照組）中miR-124的表達(dá)水平；采用MTT、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)等研究姜黃素調(diào)控的miR-124抑制人骨肉瘤細(xì)胞MG-63的生長(zhǎng)增殖能力；運(yùn)用蛋白質(zhì)印跡技術(shù)（Western blot）和熒光素酶報(bào)告基

2、因方法研究miR-124直接調(diào)控的靶基因。
　　結(jié)果：MTT結(jié)果顯示，與DMSO對(duì)照組細(xì)胞相比，姜黃素處理組的人骨肉瘤細(xì)胞MG-63的增殖能力明顯受到抑制，抑制效應(yīng)呈劑量依賴(lài)關(guān)系。qRT-PCR結(jié)果發(fā)現(xiàn)，姜黃素處理組中的miR-124表達(dá)量較DMSO對(duì)照組明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；轉(zhuǎn)染miR-124 mimics12 h、24 h和48 h后，細(xì)胞株的生長(zhǎng)明顯受到了抑制（抑制率分別為47.9％，58.5%和67.

3、1%），差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05），并具有時(shí)間依賴(lài)性；細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)顯示，轉(zhuǎn)染miR-124 mimics24 h后傷口愈合率明顯減緩，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)結(jié)果證實(shí)了SPHK1（Sphingosine kinase1，鞘氨醇激酶）是miR-124直接調(diào)控的靶基因；WB(Western blot)結(jié)果顯示，miR-124能抑制SPHK1蛋白在人骨肉瘤細(xì)胞MG-63中的表達(dá)。
　　結(jié)論：