乳果糖對圍產(chǎn)期犢牛免疫功能及糞樣細(xì)菌區(qū)系的影響.pdf

1、本課題選用乳果糖為替抗生素物質(zhì)，主要研究處于圍產(chǎn)期的犢牛乳料中添加乳果糖對犢牛免疫功能及糞樣細(xì)菌區(qū)系的影響，從而評價乳果糖作為替抗生素物質(zhì)添加到犢牛乳料中對犢牛健康及生長發(fā)育的作用。 實驗選用同一牛場同一批從澳大利亞進口的青年荷斯坦奶牛所產(chǎn)公犢牛25頭，按時間順序分為5組，每組5頭，飼養(yǎng)時間從初生～圍產(chǎn)期結(jié)束(第15日齡)，以隨機單位組設(shè)計方法確定每組犢牛乳料中不同的添加物。各種添加物分別為：對照組(A)，乳料中不添加任何添加物

2、；金霉素組(B)，1萬IU/頭·d(3～15日齡)；金霉素+乳果糖組(C)，金霉素添加同B組，乳果糖添加同D組；乳果糖組(D)，10g/頭·d(0～15日齡)；乳果糖組(E)，15g/頭·d(0～15日齡)。各種添加物與乳混合均勻后在早上一次飼喂給犢牛。按常規(guī)飼養(yǎng)管理程序?qū)倥＿M行飼養(yǎng)管理，1周齡內(nèi)日喂奶3次，1.5kg/次；1周后日喂奶2次，2.7kg/次。測定指標(biāo)包括：體重，體尺；腹瀉指數(shù)；糞樣大腸桿菌和雙歧桿菌培養(yǎng)計數(shù)；糞樣細(xì)菌區(qū)

3、系的變性梯度凝膠電泳(DGGE)分析；免疫器官指數(shù)；血液中T、B淋巴細(xì)胞計數(shù)，淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率，C反應(yīng)蛋白(CRP)含量，IgG含量；小腸壁厚度。 研究結(jié)果如下：(1)乳果糖對圍產(chǎn)期內(nèi)犢牛生長性能無明顯提高。犢牛初生時，平均體重為37.84±3.66kg，1周齡結(jié)束時(即第8d)和圍產(chǎn)期結(jié)束時(即第16d)犢牛平均體重分別為：42.22±4.34kg，45.66±4.26kg，組間差異不顯著(p＞0.05)。日增重組間差異也不顯著

4、(p＞0.05)，大部分體尺指標(biāo)(體直長、體斜長、胸圍、管圍)組間差異不顯著(p＞0.05)。初生～第7日齡體重增加速度(0.63kg/d)大于第8日齡～第15日齡增加速度(0.43kg/d)，犢牛體尺增長速度與體重變化相似。 (2)乳果糖降低了腹瀉的發(fā)生率，但效果不如金霉素或二者聯(lián)用明顯。A組的腹瀉指數(shù)最高(17.33﹪)，其次為D組(10.67﹪)，隨后為E組(8.00﹪)、B組(5.33﹪)、C組(2.67﹪)。C組與A組

5、組間差異顯著(0.01＜p＜0.05)，乳果糖與金霉素在降低犢牛腹瀉率方面存在協(xié)同效應(yīng)。 (3)乳果糖能抑制有害細(xì)菌大腸桿菌的增殖，特異性地促進雙歧桿菌增殖，且乳果糖與金霉素存在協(xié)同效應(yīng)。犢牛出生后首次排出胎糞進行培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)大腸桿菌和雙歧桿菌數(shù)量極微，其平均數(shù)分別為：0.41±0.09萬個/g，0.03±0.02萬個/g，組間差異不顯著(p＞0.05)。從第24h開始，D、E組雙歧桿菌的數(shù)量極顯著高于A、B組(p＜0.01)。第8

6、d和第16d，D、E組大腸桿菌數(shù)量顯著低于A組(0.01＜p＜0.05)，但顯著多于B組(0.01＜p＜0.05)，證明乳果糖抑制大腸桿菌的作用不如抗生素。金霉素與乳果糖的協(xié)同效應(yīng)表現(xiàn)在：C組第8d和第16d時大腸桿菌數(shù)量平均值(470.00±30.50萬個/g，530.07±15.17萬個/g)低于其它處理組，雙歧桿菌數(shù)量平均值(4800.00±502.99萬個/g，5700.00±466.90萬個/g)高于其它處理組，與其它組間差異

7、極顯著(p＜0.01)。(4)DGGE分析發(fā)現(xiàn)，乳果糖會促進微生物區(qū)系的建立和成熟，抗生素會破壞微生物區(qū)系，乳果糖和抗生素的協(xié)同作用表現(xiàn)在能特異性地促進某些細(xì)菌的增殖。D、E組第8d和第16d時犢牛糞樣細(xì)菌區(qū)系DGGE圖譜間相似性大于75﹪，可歸為1組，且1周齡內(nèi)變化迅速，而后緩慢，說明乳果糖能使?fàn)倥＜S樣微生物區(qū)系提早發(fā)育到較為成熟的狀態(tài)；B組DGGE圖譜與其它組比較帶譜顯得簡單，不僅泳帶數(shù)少，而且灰度較弱，第8d和第16d時與其它處理

8、組圖譜間相似性小于70﹪，說明其破壞了犢牛糞樣的微生物區(qū)系；C組第8d和第16d時DGGE圖譜泳帶數(shù)量少于D、E組，但某些泳帶的灰度要強于D、E組，說明乳果糖和抗生素的協(xié)同作用表現(xiàn)在能特異性地促進某些細(xì)菌的增殖。 (5)乳果糖能增強犢牛免疫功能。乳果糖對犢牛免疫器官指數(shù)，血液中T、B淋巴細(xì)胞百分含量無顯著影響，圍產(chǎn)期結(jié)束的犢牛肝臟指數(shù)和脾臟指數(shù)平均值分別為2.38﹪±0.19﹪、0.57﹪±0.06﹪；犢牛血液中T淋巴細(xì)胞百分含

9、量平均值初生、24h、第8d、第16d分別為61.62﹪±1.56﹪、74.40﹪±1.90﹪、79.52﹪±1.66﹪、85.38﹪±1.59﹪；犢牛血液中B淋巴細(xì)胞百分含量平均值初生、24h、第8d、第16d分別為38.38﹪±1.56﹪、25.60﹪±1.90﹪、20.48﹪±1.66﹪、14.62﹪±1.59﹪。淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率從24h開始，D、E組均與A組和B組組間差異極顯著(p＜0.01)。乳果糖與金霉素在促進淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率方

10、面存在協(xié)同效應(yīng)。 (6)乳果糖能提高犢牛血液中C反應(yīng)蛋白(CRP)含量。初生時各處理組組間差異不顯著(p＞0.05)，初生犢牛血液中CRP平均含量為：4.29±0.47ug/ml。從24h開始，C組、D組、E組均與A組和B組組間差異顯著(0.01＜p＜0.05)。同時，乳果糖與金霉素聯(lián)用時，金霉素削弱了乳果糖提高犢牛血液中CRP含量，第8d和第16d時C組犢牛血液中CRP含量分別為：20.70±0.47ug/ml、22.34±0

11、.42ug/ml，低于D組(23.00±0.38ug/ml、25.58±0.38ug/ml)、E組(25.92±0.37ug/ml、29.44±0.70ug/ml)。犢牛飼喂初乳后1d，CRP即升高(從4.29±0.47ug/ml上升到19.63±3.13ug/ml)，說明CRP有可能來自于初乳到犢牛血液的被動轉(zhuǎn)移。 (7)乳果糖能提高犢牛血液中IgG含量。初生時各處理組組間差異不顯著(p＞0.05)，初生犢牛血液中IgG平均含

12、量為：0.26±0.04mg/ml。從24h開始，C組、D組、E組均極顯著高于A組和B組(p＜0.01)，B組的含量最低。C組犢牛血液IgG含量高于D組但低于E組，證明金霉素同乳果糖之間存在協(xié)同效應(yīng)，但金霉素的增加效果不如添加乳果糖增加的效果。 (8)乳果糖能促進腸壁的完整性，抗生素會破壞腸壁的完整性。腸壁厚度方面，十二指腸、空腸近端、空腸遠(yuǎn)端組間差異情況相同，即A組、C組、D組、E組腸壁厚度均極顯著高于B組(p＜0.01)?；?/p>

13、腸厚度組間差異性為：C組(1814.39±138.70um)與B組(1648.45±89.07um)組間差異不顯著(p＞0.05)，此差異性與其它腸段不同。證明乳果糖有助于維持腸道完整性，抗生素會降低腸壁厚度，但乳果糖與抗生素合用會降低抗生素對腸壁完整性的破壞。 研究結(jié)果表明：乳果糖及抗生素對犢牛生長性能無顯著性影響，尚需進一步研究；乳果糖能降低犢牛腹瀉率，但效果不如金霉素或二者合用明顯；乳果糖能促進犢牛糞樣細(xì)菌區(qū)系的成熟、穩(wěn)定