Genistein及聯(lián)合5-Fu對(duì)人胃癌裸鼠原位移植瘤生長和轉(zhuǎn)移的影響及其相關(guān)機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究Genistein(金雀異黃素、Gen)、5-Fu在體內(nèi)對(duì)人胃癌細(xì)胞生長的抑制是否具有協(xié)同或相加作用，是否可以抑制腫瘤的侵襲性生長，并探討其相關(guān)機(jī)制。 方法：24只裸小鼠建立胃癌原位移植瘤模型，隨機(jī)分為四組(每組6只)：對(duì)照組；5-Fu組(10mg／kg)；Gen組(O．5mg／kg)；聯(lián)合組：Gen+5-Fu(5-Fu10mg／kg+Gen0．5mg／kg)組。采用腹腔給藥方式，連續(xù)給藥30天，每天觀察裸鼠一般情況并

2、記錄體重，實(shí)驗(yàn)開始第lO周末處死動(dòng)物觀測(cè)裸鼠原位移植瘤體積、重量、病理形態(tài)，比較各組腹腔內(nèi)腫瘤局部浸潤、局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝脾轉(zhuǎn)移情況。應(yīng)用Westernblot檢測(cè)Caspase-3蛋白、DNA末端原位標(biāo)記法(Tunel法)檢測(cè)移植瘤癌細(xì)胞凋亡。免疫組織化學(xué)S-ABC法檢測(cè)移植瘤組織E-cadherin、MMP-9、VEGF-C蛋白表達(dá)水平，并以CD-34、D2-40標(biāo)記微血管和微淋巴管并計(jì)數(shù)和微淋巴管密度(MLD)。Westernbl

3、ot檢測(cè)移植瘤組織NF-r,B、E-cadherin、MMP-9、VEGF-C蛋白含量。 結(jié)果：1．成功建立胃癌裸鼠原位移植瘤模型。2．移植瘤體積：Gen+5-Fu組移植瘤體積為(214．50+26．60)mm3，5-Fu組為(397．24~50．84)mm3(P<0．05)，Gen組為(382．424-45．09)mm3，對(duì)照組為(750．82+95．19)mm3(P<0．05)。3．各組抑瘤率分別為：聯(lián)合用藥組69．43％，

4、5-Fu組45．86％、Gen組52．87％。4．Tunel檢測(cè)結(jié)果顯示，Gen+5-Fu處理組凋亡指數(shù)(AI)為(¨．73+0．68)％；5-Fu組為(6．70+0．49)％；Gen組為(8．324-0．62)％；對(duì)照組為(3．13+0．28)％。5．Westernblot檢測(cè)結(jié)果顯示：聯(lián)合組Caspase-3蛋白表達(dá)水平高于各單藥組，顯著高于對(duì)照組。而Gen組和聯(lián)合組NF-rd3蛋白表達(dá)水平明顯弱于對(duì)照組及5-Fu組。6．聯(lián)合組局部

5、浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臟器轉(zhuǎn)移發(fā)生率顯著低于對(duì)照組P<0．05)，強(qiáng)于各單藥組。7．Gen組、Gen+5-Fu組移植瘤中MVD、MLD顯著少于對(duì)照組和5-Fu組P<0．05)。8．免疫組化和Westernblot結(jié)果顯示：Gen+5-Fu組MMP-9、VEGF-C蛋白表達(dá)水平低于各單藥組，顯著低于對(duì)照組，而E-cadherin蛋白表達(dá)水平高于各單藥組，顯著高于對(duì)照組。 結(jié)論：Genistein聯(lián)合5-Fu可顯著抑制胃癌原位移植瘤的生