蟾毒靈對(duì)裸鼠人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制.pdf

1、復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文題目蟾毒靈對(duì)裸鼠人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制Theeffectandmechanismofbufalinongrowthstageandmetastaticpotentialofhepatocellularcarcinomainnudemice院系：中山醫(yī)院專業(yè)：中西醫(yī)結(jié)合臨床(腫瘤研究)姓名：張洲姬指導(dǎo)小組成員名單：楊云柯副教授李立新副主任醫(yī)師王國(guó)驊主治醫(yī)師本課題由國(guó)家中醫(yī)藥管理局“十二五“腫瘤

2、重點(diǎn)?？平ㄔO(shè)項(xiàng)目和上海市衛(wèi)生局科研課題(20124056)聯(lián)合資助二零一四年四月復(fù)旦大學(xué)碩士學(xué)位論文蟾毒靈對(duì)裸鼠人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制中文摘要背景最新研究指出原發(fā)性肝癌因高發(fā)病率、高死亡率(惡性腫瘤發(fā)病率中男性居第五、女性居第七，死亡率中男性居第二、女性居第六)，已然倍受全球矚目。即便手術(shù)切除、介入栓塞、伽瑪射線、射頻消融、肝移植等治療技術(shù)日益完善，一旦評(píng)定為晚期肝癌，其中位生存時(shí)間僅68個(gè)月。因此，如何預(yù)防肝

3、癌的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移，從而提高肝癌患者生存率，是目前研究的主要方向。本課題組在既往研究成果基礎(chǔ)上，首次提出：肝癌高復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移率的主要原因是“肝癌余毒未清”的假說(shuō)，認(rèn)為一方面肝癌形成的主要危險(xiǎn)因素包括肝炎病毒、黃曲霉素、有機(jī)氯化合物、藻類毒素等未得到有效控制，另一方面，適宜肝癌術(shù)后復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的腫瘤微環(huán)境持續(xù)存在。因此，如何持續(xù)清除“肝癌余毒”可能成為預(yù)防肝癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移的主要路徑。蟾酥制劑具有“祛濕化瘀、清熱解毒”功效，提取物蟾毒靈(bufali

4、n)的近期研究成果均被證實(shí)其可抑制肝癌細(xì)胞株的增殖、侵襲、遷移，其中體外實(shí)驗(yàn)機(jī)制針對(duì)AKT靶點(diǎn)，影響AKT／GSK313／13catenin／Ecadherin信號(hào)通路相應(yīng)因子，并且結(jié)合腫瘤微環(huán)境的角度，己證實(shí)其具備抑制多種惡性腫瘤細(xì)胞株侵襲及遷移的能力，逐步成為國(guó)內(nèi)、外研究焦點(diǎn)問(wèn)題。原發(fā)性肝癌具有器官傾向性，所以建立單克隆人肝癌細(xì)胞株肺靶向轉(zhuǎn)移裸鼠模型，運(yùn)用bufalin驗(yàn)證之前體外實(shí)驗(yàn)機(jī)制，進(jìn)一步確定有效的體內(nèi)治療方法勢(shì)在必行。目的

5、本研究從體內(nèi)實(shí)驗(yàn)觀察bufalin對(duì)裸鼠人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤的生長(zhǎng)、肝癌組織壞死及細(xì)胞凋亡、肺轉(zhuǎn)移灶形成的影響，并以AKT作為靶點(diǎn)，進(jìn)一步深入探討其對(duì)肝原位移植瘤AKT／GSK3B／Bcatenin／Ecadherin信號(hào)通路相關(guān)蛋白的變化趨勢(shì)及相關(guān)現(xiàn)象產(chǎn)生的機(jī)理。方法建立熒光高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞株HCCLM3R和相應(yīng)裸鼠模型的基礎(chǔ)上，隨機(jī)分組符合造模標(biāo)準(zhǔn)的人肝癌細(xì)胞株肝原位移植瘤裸鼠，運(yùn)用生理鹽水(NS)為陰性對(duì)照組、1mg／kgbuf