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文檔簡介
1、目的:采用RNA干擾靶向沉默HIF-1α基因的表達,研究其對人腎癌細胞株786-O裸鼠移植瘤生長的影響。
方法:將人腎癌786-O細胞體外培養(yǎng),選取對數(shù)生長期細胞接種于裸鼠右側(cè)前肢腋窩皮下致瘤,15天后隨機分成三組:實驗組(重組質(zhì)粒組)、陰性對照組(空載體組)、空白對照組。利用本課題組前期已成功構建并通過驗證有效的HIF-1α基因的siRNA表達載體多點注射于移植瘤瘤內(nèi)及瘤周;空載體對照組予以等量空載體多點注射瘤內(nèi)及瘤周;空白
2、對照組不做任何處理,每3天注射一次,共注射8次,統(tǒng)計移植瘤生長體積。50天時,頸椎脫臼法處死裸鼠,剝離瘤體組織,稱重,并采用免疫組化檢測HIF-1α、VEGF蛋白的表達。
結(jié)果:常規(guī)病理切片證實各組均成功建立裸鼠人腎癌的皮下移植瘤模型。實驗結(jié)果顯示:實驗組裸鼠移植瘤的生長較陰性對照組和空白對照組明顯受到抑制(P<0.01),陰性對照組和空白對照組比較無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。免疫組化結(jié)果顯示:實驗組HIF-1α、VEGF蛋
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