P120ctn、Kaiso及MTA2在胸腺瘤中表達的關系及意義.pdf

1、目的：胸腺上皮性腫瘤是前上縱膈最常見的原發(fā)腫瘤,起源于胸腺上皮細胞或向胸腺上皮分化的干細胞。2004年,WHO根據胸腺瘤的上皮細胞形態(tài)、排列方式以及淋巴細胞在腫瘤組織中的比例,將胸腺瘤劃分為A、AB、B1、B2和B3五種常見亞型,以及其他少見特殊類型。胸腺瘤的ICD-O行為編碼為1,多項研究發(fā)現(xiàn),雖然A、AB和B1型胸腺瘤基本上屬于良性腫瘤,預后較好,但少數也可復發(fā)或轉移;而B2和B3型胸腺瘤雖具有較高的侵襲性,預后相對較差,但也有少數

2、病例呈良性經過。故探討反映該類腫瘤生物學行為的標記物,對于腫瘤術后的治療具有重要的指導性意義。
　　 腫瘤轉移相關基因2(MetastasisTumorAntigen2,MTA2)是新近發(fā)現(xiàn)的一個腫瘤候選基因——MTA(MTA1,MTA2,MTA3)家族的成員之一。MTA2蛋白是具有核小體重塑活性的組蛋白去乙酰基酶(nueleosomeremodelingdeacetylase,NuRD)的亞基。研究發(fā)現(xiàn),MTA2與人類一些腫瘤

3、如卵巢癌、乳腺癌、肝癌、非小細胞肺癌等的侵襲轉移關系密切,是反映腫瘤生物學行為的很好的標記物。
　　 MTA2是轉錄抑制因子Kaiso的下游靶基因,而P120連環(huán)蛋白(P120catenin,P120ctn)又可調節(jié)Kaiso的核漿分布和功能,但三者在胸腺瘤中的表達及關系是否能夠反映胸腺瘤的生物學行為尚不清楚。本研究旨在探討胸腺瘤中P120ctn、Kaiso和MTA2的表達情況及其與臨床病理學參數的關系,并探討這種表達及關系反映

4、胸腺瘤的生物學行為的可能性。
　　 材料與方法:
　　 1、材料
　　 標本來源于中國醫(yī)科大學第一附屬醫(yī)院2007年12月～2011年8月經外科手術切除的胸腺瘤組織137例,其中男性59例,女性78例;年齡19～75歲,平均年齡51歲。腫瘤平均直徑為5cm(1～15cm),伴有重癥肌無力癥狀的6l例,不伴有重癥肌無力癥狀的76例。標本由兩位有經驗的病理醫(yī)師根據2004年WHO胸腺腫瘤組織學分類標準診斷:其中A型胸

5、腺瘤11例,AB型胸腺瘤50例,B1型胸腺瘤22例,B2型胸腺瘤37例,B3型胸腺瘤17例。按照Masaoka的胸腺瘤臨床分期:Ⅰ期胸腺瘤53例,Ⅱ期胸腺瘤31例,Ⅲ期胸腺瘤46例,Ⅳ期胸腺瘤7例。另外選取胸腺癌3例,胸腺瘤旁正常胸腺組織18例作為對照,患者術前均未接受過放化療。
　　 2、免疫細胞化學染色
　　 將標本制成4μm連續(xù)切片,經脫蠟、脫苯、水化后,采用鏈霉菌抗生物素蛋白—過氧化酶免疫組化法(S-P法)進行染

6、色。鼠抗人p120ctn單克隆抗體(1:200,catalognumber:610134購自美國BDTransductionLaboratories公司)和鼠抗人Kaiso單克隆抗體(1:200,購自美國Millipore公司),兔抗人MTA2多克隆抗體(1:800ab8106購自英國abeam公司香港分公司)。一抗4℃孵育過夜。以本實驗室已有的強表達的肺癌組織為陽性對照,以PBS緩沖液代替一抗為空白對照。SP染色超敏試劑盒(KIT-9

7、710)、DAB顯色劑(DAB0031)購自福州邁新公司。
　　 3、結果判定
　　 采用半定量評分標準,進行染色強度評分:無著色為0分,淡黃色顆粒為1分,棕黃色顆粒為2分,黃褐色顆粒為3分:陽性細胞百分比評分:每張切片隨機選取5個高倍視野,每個高倍視野計數100個胸腺上皮腫瘤細胞。陽性細胞≤10%為0分,11%～25%為1分,26%～75%為2分≥76%為3分。陽性細胞百分比的評分與染色強度的評分相乘得到最終的評分。對

8、于Kaiso,當最終評分≤1定義為陰性表達,≥2為陽性表達;P120ctn正常表達的陽性信號定位于細胞膜,當腫瘤細胞胞漿陽性表達,且最終評分≥2時定義為異位漿表達陽性:MTA2主要在細胞核中表達,胞漿同時略有表達,將最終評分≥2分定義為MTA2陽性表達。最終評分3-5分定義為中等陽性表達,最終評分≥6分定義為強陽性表達。
　　 4、統(tǒng)計分析
　　 各組資料應用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析,P＜0.05為有統(tǒng)計學意義。

9、
　　 結果:
　　 正常胸腺上皮細胞中P120ctn為細胞膜連續(xù)表達,kaiso和MTA2為陰性表達。P120ctn在胸腺瘤細胞中出現(xiàn)膜表達減弱和胞漿異位表達,胞漿異位表達率為76.6%(105/137)。Kaiso主要在胸腺瘤細胞漿中表達,陽性表達率為69.3%(95/137)。MTA2主要表達于胸腺瘤細胞核,陽性表達率為70.8%(97/137)。胸腺瘤細胞中P120ctn異位漿表達、Kaiso漿表達及MTA2的核

10、表達兩兩間存在有較好的一致性(Kappa=0.559,P＜0.001;Kappa=0.512,P＜0.001;Kappa=0.652,P＜0.001)和相關性(r=0.733,P＜0.001;r=0.652,P＜0.001;r=0.708,P＜0.001),并與組織學分型及臨床分期相關(P＜0.05)。High-risk(B2、B3型)胸腺瘤組的P120ctn、Kaiso胞漿表達及MTA2胞核表達均高于low-risk(A、AB和B1型