油茶蒲醇提物抑制5α-還原酶及對(duì)前列腺疾病的作用.pdf

1、⑧論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：論文評(píng)閱人1 ：評(píng)閱人2 ：評(píng)閱人3 ：評(píng)閱人4 ：評(píng)閱人5 ：答辯委員會(huì)主席：委員1 ：委員2 ：委員3 ：委員4 ：委員5 ：答辯日期：食一生太 堂堂直 太太H |江一江一江一逝浙一逝一一一 援援攫 扎扎扎 進(jìn)一進(jìn)一籃 迭避王避監(jiān)監(jiān)逖爛一一一一一型型逝避幽斯江太堂亟±論塞． 摘要摘要實(shí)驗(yàn)室前期研究表明，油茶蒲醇提物具有強(qiáng)抗氧化、抑制腫瘤細(xì)胞增殖、抑制小鼠腹水s 1 8 0 瘤生長(zhǎng)，降脂減肥的功

2、能。小范圍試用人群表明，油茶蒲醇提物能減輕前列腺增生的癥狀。本文重點(diǎn)研究了油茶蒲醇提物對(duì)5 廿還原酶的抑制能力以及它對(duì)與此酶相關(guān)的前列腺增生( B P H ) 和前列腺癌( P C a ) 的作用。主要的研究?jī)?nèi)容和結(jié)果如下：( 1 ) 通過比較精密度、回收率和穩(wěn)定性，確定采用香草醛．冰醋酸．高氯酸法測(cè)定提取物中總皂素，F(xiàn) o I i n ．c i o c a l t e 繃法測(cè)定總酚，紫外法測(cè)定總黃酮。油茶蒲醇提物中含2 7 ．3 5

3、％皂素，2 2 ．4 1 ％多酚，2 ．8 1 ％黃酮；正丁醇相中皂素含量最高，達(dá)4 4 ．0 5 ％；乙酸乙酯相中多酚含量最高，達(dá)3 5 ．3 4 ％。正丁醇相過D 1 0 l 樹脂，經(jīng)乙醇梯度洗脫后，多酚主要集中在2 0 ％乙醇( 2 0 A L ) 和4 0 ％乙醇( 4 0 A L ) 洗脫相中，皂素在各個(gè)洗脫相中均有分布。( 2 ) 利用分光光度法建立5 a 一還原酶的體外篩選模型：睪酮2 0p M ，N A D P H 4

4、0p M ，酶提取液2 1 6 嵋，在含有D T T 1 m M ，磷酸鈉4 0 1 1 1 M ，p H6 ．5 的緩沖溶液中，3 7 ℃反應(yīng)4 m i I l 。在此條件下加入l O 峙／m L 醇提物體，體系內(nèi)5 洳還原酶的剩余活性( R A ) 為5 4 ．9 2 哆釷9 ．3 1 ％；乙酸乙酯相和正丁醇相抑制酶活的能力都增強(qiáng)，同濃度下R A 分別為3 0 ．5 8 ％士0 ．6 5 ％和2 0 ．7 l ％士0 ．5 4 ％；

5、正丁醇相的乙醇洗脫物中4 0 A L 活性明顯增強(qiáng)，R A 僅為3 ．1 8 ％士2 ．8 1 ％。( 3 ) 在丙酸睪酮致大鼠前列腺增生模型中，油茶蒲醇提物可降低大鼠前列腺重、前列腺指數(shù)，增加第2 2 天的尿流量( 高劑量組尸< O ．0 5 ) ，降低前列腺上皮細(xì)胞的高度。在肥胖小鼠模型中，油茶蒲醇提物中劑量組( 尸< O ．0 5 ) 和高劑量組( 尸< 0 ．0 1 ) 均顯著地降低肥胖小鼠的前列腺指數(shù)。( 4

6、 ) 油茶蒲醇提物可抑制前列腺癌細(xì)胞P c 一3 的增殖，4 8h 半抑制濃度I c 5 0 為1 5 1 ．6嶺／m L ；正丁醇相抑制P C 一3 細(xì)胞的能力增強(qiáng)，4 8h 的I C 5 0 為5 4 ．8 p g ／m L ；正丁醇相過D 1 0 l大孔樹脂后，2 0 A L 和4 0 A L 的抑制活性減弱，6 0 ％乙醇洗脫相( 6 0 A L ) 和8 0 ％乙醇洗脫相( 8 0 A L ) 的活性增強(qiáng)；6 b A L 和8

7、 0 A L 在4 8 h 的I c 5 0 分別為4 3 ．O 舭和2 8 ．1 嵋／m L 。通過形態(tài)學(xué)觀察和吖啶橙染色可以發(fā)現(xiàn)，6 0 A L 和8 0 A L 可以誘導(dǎo)P c ．3 細(xì)胞凋亡。綜上所述，油茶蒲醇提物可有效地抑制5 泓還原酶的活性，改善丙酸睪酮致前列腺增生大鼠和肥胖小鼠前列腺增生的癥狀，抑制P C - 3 細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。關(guān)鍵詞：油茶蒲；皂素；多酚；黃酮；5 Q ．還原酶；前列腺增生；前列腺癌：P C