右美沙芬對大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)元損傷及Bcl-2表達(dá)的影響.pdf

1、目的：建立大鼠大腦中動脈栓塞(MCAO)模型，研究缺血再灌注神經(jīng)細(xì)胞凋亡的發(fā)生規(guī)律。從行為學(xué)到細(xì)胞、分子水平評價(jià)NMDA受體阻滯劑右美沙芬對缺血再灌注損傷的治療作用。探討右美沙芬的作用機(jī)理。 方法：動物模型制備：參照Magasawa與ZeaLonga等線栓法阻斷大腦中動脈(MCAO)動物模型。雄性SD大鼠，40只，250～300g，隨機(jī)分為5組：假手術(shù)組(SHAM，5只)，只進(jìn)行分離血管手術(shù)不阻斷，腹腔注射生理鹽水3ml；缺血再

2、灌注組(IR，5只)，分離頸外動脈與頸總動脈，阻斷大腦中動脈血流60分鐘后再灌注，阻斷前30min注射生理鹽水3ml；右美沙芬干預(yù)組(DM)分別為DMl0(10只)，DM30(10只)，DM50(10只)；于阻斷前30分鐘別接受10mg／Kg，30mg／Kg,50mg／Kg右美沙芬腹腔注射。再灌注后2h和24h用改良神經(jīng)功能損傷評分(mNSS)量化測定神經(jīng)功能缺失。再灌注后24h取腦觀察組織學(xué)改變，腦細(xì)胞凋亡以TUNEL法測定，用半定量

3、RT-PCR測定Bcl-2mRNA在大鼠腦內(nèi)的表達(dá)。 結(jié)果：(1)與假手術(shù)相比，缺血再灌注組的缺血側(cè)腦組織存在明顯的梗死區(qū)，在梗死區(qū)周邊有明顯的細(xì)胞凋亡；(2)與缺血再灌注組相比，3個(gè)右美沙芬干預(yù)組的梗死體積、凋亡細(xì)胞均較之明顯減少，P＜0．05；(3)右美沙芬組內(nèi)比較：DX30與DX50組相比無明顯差異，兩組均優(yōu)于DXIO組；(4)假手術(shù)組幾乎沒有Bcl一2表達(dá)，缺血再灌注組Bcl一2有表達(dá)，右美沙芬干預(yù)組Bcl一2高表達(dá)。

4、 結(jié)論：線栓法阻斷大鼠MCA制備局灶性腦缺血再灌注模型，模擬了人類腦梗塞溶栓或其他原因?qū)е卵茉偻ê蟮牟±砩砀淖冞^程，是研究腦缺血再灌注損傷病理生理機(jī)制和評價(jià)抗腦血管損傷藥物的理想模型。右美沙芬處理對大鼠腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用，減少組織梗死體積，減輕細(xì)胞凋亡，上調(diào)bcl-2mRNA的表達(dá)，右美沙芬能夠通過上調(diào)bcl-2mRNA的表達(dá)對缺血再灌注的大鼠腦起保護(hù)作用。然而，右美沙芬阻斷NMDA受體后，通過何種途徑調(diào)節(jié)Bcl．2