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1、目的:觀察熄風(fēng)化痰活血飲對(duì)大鼠急性局灶性腦缺血再灌注損傷模型的影響,探討熄風(fēng)化痰活血飲治療急性腦缺血再灌注損傷的部分作用機(jī)理,為臨床今后進(jìn)一步開(kāi)發(fā)有效的治療急性缺血性中風(fēng)的中醫(yī)藥提供科學(xué)依據(jù)。 方法:選用SD健康大鼠60只,體重在320±20g,雌雄各半,隨機(jī)分為6組:假手術(shù)組、模型組、尼莫地平組、熄風(fēng)化痰活血飲高、中、低劑量組,采用插線法復(fù)制大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型。假手術(shù)組和模型組給予蒸餾水3ml/100g·d;尼莫地
2、平組給予尼莫地平混懸液3ml/100g·d(0.6mg/100g);熄風(fēng)化痰活血飲高、中、低劑量組分別給予臨床用藥量的25、20、15倍水煎濃縮液灌胃,用量均按人與大鼠體表面積等效劑量折算,各組等容灌胃,每日2次;灌胃6天后,第7天采用線栓法復(fù)制大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷模型,造模前2h最后一次給藥,第24h后腹主動(dòng)脈取血進(jìn)行超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的檢測(cè),斷頭取腦組織稱重后,常規(guī)固定,HE染色,進(jìn)行病理組織學(xué)觀察,并
3、應(yīng)用原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶標(biāo)記技術(shù)(TUNEL)檢測(cè)腦神經(jīng)細(xì)胞凋亡,應(yīng)用免疫組化法檢測(cè)Bcl-2染色細(xì)胞陽(yáng)性數(shù)。 結(jié)果:模型組大鼠腦指數(shù)、神經(jīng)體征評(píng)分明顯高于假手術(shù)組(P<0.05),與模型組相比,熄風(fēng)化痰活血飲高劑量、中劑量組大鼠腦指數(shù)、神經(jīng)體征減輕最為明顯(P<0.01);與假手術(shù)組相比,模型組大鼠血清MDA明顯升高,血清SOD明顯降低,Bcl-2染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯降低、神經(jīng)細(xì)胞凋亡陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯增高(P<0.01),有顯
4、著性差異;與模型組相比,給藥組動(dòng)物血清SOD明顯升高、血清MDA明顯降低、神經(jīng)細(xì)胞凋亡陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯降低(P<0.01),Bcl-2染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)明顯升高(P<0.05),有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與尼莫地平組相比,熄風(fēng)化痰活血飲高劑量組腦指數(shù)、凋亡細(xì)胞數(shù)、血清MDA明顯降低,血清SOD、Bcl-2明顯升高(P<0.05);腦組織切片TTC染色顯示模型組大鼠腦組織梗死區(qū)域最大,各給藥組大鼠腦組織缺血區(qū)域明顯減小;病理組織學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)模型組動(dòng)物大腦
5、組織出現(xiàn)不同程度水腫,神經(jīng)細(xì)胞軸索腫脹、斷裂等缺血樣改變,給藥組動(dòng)物上述病變明顯減輕。 結(jié)論:熄風(fēng)活血化痰飲對(duì)大鼠急性腦缺血再灌注損傷具有保護(hù)作用,作用同于尼莫地平組,在熄風(fēng)化痰活血飲大、中、小劑量各治療組中,尤以熄風(fēng)化痰活血飲高劑量、中劑量組效果最好。熄風(fēng)化痰活血飲能明顯改善急性腦缺血再灌注大鼠神經(jīng)體征、腦水腫,可通過(guò)上調(diào)腦組織Bcl-2,血清SOD;下調(diào)血清MDA水平,對(duì)抗急性腦缺血再灌注時(shí)自由基對(duì)腦組織的損傷作用,抑制細(xì)胞
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