IL-1β和TNF-α表達(dá)與骨性關(guān)節(jié)炎的相關(guān)性研究.pdf

1、目的： 本課題旨在研究不同損傷程度的骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)關(guān)節(jié)液中，IL-1β和TNF-α的濃度與軟骨中Ⅱ型膠原含量的相關(guān)性，及IL-1β和TNF-α與軟骨中Ⅱ型膠原各自在不同時期的統(tǒng)計學(xué)差異。從而，進(jìn)一步探討骨性關(guān)節(jié)炎的發(fā)病機(jī)制。 資料與方法： 1．實(shí)驗動物：新西蘭大白兔20只，普通級，許可證號SCXK（魯）20040013，體重平均2．2-2．5kg，均為雄性，由山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院動物中心提供。隨機(jī)分為4組，每組5只（10

2、膝）。 2．骨性關(guān)節(jié)炎動物模型的制作：Hulth模型是最常用的骨性關(guān)節(jié)炎動物模型。 3．IL-1β和TNF-α與Ⅱ型膠原含量測定：在動物模型成功后，4周、5周、6周分別抽取關(guān)節(jié)液，測IL-1β和TNF-α的濃度。并檢測關(guān)節(jié)軟骨中的Ⅱ型膠原含量。 4．兩組實(shí)驗動物關(guān)節(jié)外觀情況。 5．標(biāo)本的初步處理：分別取正常和動物模型成功后4、5、6周，兔后肢股骨髁，用10%多聚甲醛固定，15%中性EDTA脫鈣。常規(guī)脫水，

3、透明，石蠟包埋，制成石蠟切片。 6．標(biāo)本進(jìn)行HE染色。 7．免疫組化染色：用SP法對標(biāo)本進(jìn)行Ⅱ型膠原測定。 8．統(tǒng)計分析：IL-1β和TNF-α含量及Ⅱ型膠原數(shù)據(jù)用SAS8．1統(tǒng)計分析軟件進(jìn)行spearman等級相關(guān)性分析和方差分析，統(tǒng)計學(xué)水平α=0．05。 結(jié)果： 1．兩組實(shí)驗動物的關(guān)節(jié)外觀：兩者之間有明顯的差別。對照組兔膝關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)軟骨都為淡藍(lán)白色，光滑而有光澤。而在OA實(shí)驗組，股骨髁軟骨無光

4、澤，為淡黃白色，軟骨表面粗糙不平，出現(xiàn)裂隙，脛骨平臺內(nèi)側(cè)出現(xiàn)骨贅樣物。 2．關(guān)節(jié)液中IL-1β和TNF-α濃度：對照組兔關(guān)節(jié)液中IL-1β和TNF-α的含量很低，實(shí)驗組動物模型術(shù)后4、5、6周的測量值明顯高于對照組。 3．關(guān)節(jié)軟骨中Ⅱ型膠原的測定：對照組兔軟骨中，Ⅱ型膠原含量很高。Ⅱ型膠原隨著骨節(jié)軟骨損傷的加重，其在軟骨中的含量逐漸降低。 4．IL-1β和TNF-α與Ⅱ型膠原的相關(guān)性：IL-1β和Ⅱ型膠原、TNF

5、-α濃度和Ⅱ型膠原含量呈正相關(guān)性。，按α=0．05，對骨性關(guān)節(jié)炎兔模型術(shù)后4周、5周、6周IL-1β、TNF-α與Ⅱ型膠原檢測值，分別進(jìn)行方差分析，p均<0．05，IL-1β、TNF-α與Ⅱ型膠原均有顯著統(tǒng)計學(xué)差異。 結(jié)論： 骨關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)液中IL-1β、TNF-α與Ⅱ型膠原呈正相關(guān)。隨著關(guān)節(jié)軟骨損傷程度的加重，IL-1β和TNF-α的含量逐漸降低，而Ⅱ型膠原的數(shù)量也逐漸減少。說明IL-1β和TNF-α對骨關(guān)節(jié)炎的發(fā)生起到