煤礦作業(yè)工作誘導(dǎo)痰中轉(zhuǎn)化生長因子-β1的表達水平.pdf

1、接觸生產(chǎn)性粉塵引起的塵肺病是我國職業(yè)性疾患中發(fā)病最嚴(yán)重的職業(yè)病。由于對塵肺病的治療缺乏特異手段，塵肺的病死率極高，故而選取并監(jiān)測對工人早期接塵危害敏感的指標(biāo)，對高危人群早期脫離粉塵作業(yè)，延緩塵肺患者病程進展及延長壽命具有重要意義。近年來，呼吸道誘痰術(shù)在哮喘等疾病診斷和治療方面應(yīng)用廣泛，日益受到國際上塵肺科研人員的高度重視。誘導(dǎo)痰分析有望作為一種用于定期監(jiān)測接塵工人健康狀況的手段，對傳統(tǒng)監(jiān)測方法進行補充和完善，有助于職業(yè)性肺部疾病的診斷。

2、轉(zhuǎn)化生長因子β在調(diào)控肺成纖維細(xì)胞增殖、分裂及膠原蛋白的合成與降解過程中發(fā)揮著重要作用，與肺纖維化的關(guān)系受到高度關(guān)注。其中，TGF-β1的致纖維化作用最強，在機體損傷修復(fù)、結(jié)構(gòu)重建等方面的研究已成為焦點。
　　 目的：本研究應(yīng)用呼吸道誘痰術(shù)誘導(dǎo)不同接塵水平工人的肺深部痰液，同時測定痰液中TGF-β1的表達水平，分析其與工人接塵水平和塵肺病人肺組織病理變化的相關(guān)性，對職業(yè)史詢問及環(huán)境監(jiān)測方法等傳統(tǒng)職業(yè)病檢測方法進行補充和完善，為進一

3、步加強和改進粉塵危害早期預(yù)防和控制措施提供新的思路和手段。
　　 方法：
　　 1.呼吸道誘痰：對非塵肺工人(包括分為不同接塵工齡工人及非接塵工人)115人和塵肺患者及其相應(yīng)對照32人呼吸道誘痰。
　　 2.痰液中細(xì)胞計數(shù)及分類：先用二硫蘇糖醇處理痰液，再進行蘇木精-伊紅染色，計數(shù)細(xì)胞總數(shù)并分類計數(shù)，檢測不同受試者主要的炎性細(xì)胞，分析各組間痰細(xì)胞學(xué)特征是否存在差異。
　　 3.痰細(xì)胞內(nèi)目的基因TGF-β1

4、 mRNA表達水平的檢測：提取痰細(xì)胞總RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA第一鏈，配制PCR反應(yīng)體系，應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測TGF-β1 mRNA的表達水平。
　　 結(jié)果：
　　 1.全部研究對象均能接受痰液誘導(dǎo)，成功率為98.6％。誘導(dǎo)痰液呈灰白色或黃色，粘稠狀，接塵工人和塵肺患者痰液間或有黑色煤塵，痰液量約2ml。鱗狀上皮細(xì)胞為(8.94±3.59)％，細(xì)胞活力為(78.32±6.50)％。
　　 2.接塵工齡大于1

5、0年的工人巨噬細(xì)胞比例為(50.53±11.12)％，高于其他工齡組(P<0.05)。
　　 3.接塵工齡大于10年的工人TGF-β1 mRNA表達量是相應(yīng)對照的1.21倍(P<0.05)。
　　 4.Ⅰ期塵肺患者、Ⅱ期及Ⅲ期塵肺患者TGF-β1 mRNA表達量分別是對照的1.53倍、1.52倍(P<0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.呼吸道巨噬細(xì)胞比例的改變可能參與肺纖維化的發(fā)病過程；誘導(dǎo)痰方法可應(yīng)用