杜仲葉中生物活性成分提取分離中試研究.pdf

1、本文在小試研究的基礎(chǔ)上，對(duì)杜仲葉中生物活性物質(zhì)的提取分離工藝進(jìn)行了中間試驗(yàn)研究，并根據(jù)中試特點(diǎn)，對(duì)工藝條件進(jìn)行了改進(jìn)，確定了提取分離生物活性物質(zhì)的中間試驗(yàn)工藝流程。研究結(jié)果如下： 提取分離杜仲葉中有效成分的工藝流程為：60％乙醇→回流提取(80℃；2h/次；料液比1：16，提取3次)→制備浸膏(濃縮，50℃真空干燥)→加水轉(zhuǎn)溶(4次)→定容(濃度為0.46g/mL，調(diào)pH值2～3)→上XDA-6樹(shù)脂柱→純凈水洗脫得到糖和京尼平苷

2、酸→15％乙醇洗脫得到綠原酸(濃縮析出粗品→重結(jié)晶得到純品)→60％乙醇洗脫得到黃酮→樹(shù)脂的再生(多量醇少量酸堿法)。具體的操作要點(diǎn)如下： 1.提?。涸谥性囈?guī)模提取時(shí)采用加熱回流的提取方式。將6kg杜仲葉放入50L反應(yīng)器中，以料液比1：16加入60％乙醇在80℃行回流提取，提取時(shí)間為2h，提取次數(shù)為3次。合并提取液，過(guò)濾，濃縮干燥至浸膏狀。所得的杜仲葉浸膏得率為39.78％，其中總糖含量為32.62％，京尼平苷酸含量為1.57％

3、，綠原酸含量為6.42％，黃酮含量為6.82％。 2.上柱：將浸膏用水轉(zhuǎn)溶，過(guò)濾，濃縮至一定濃度定容(濃度確定為固形物質(zhì)量為0.46g/mL)，將其pH值調(diào)至2～3后上XDA-6樹(shù)脂柱，所用樹(shù)脂柱規(guī)格為Ф200×1500mm的層析柱，柱體積為29L。靜態(tài)吸附8h后洗脫。 3.洗脫：先用純凈水洗脫樹(shù)脂柱，將水洗脫液分段收集，第1，2柱體積經(jīng)濃縮干燥得總糖粗品，第3至第20柱體積洗脫液經(jīng)濃縮后得京尼平苷酸粗品；再用15％乙醇

4、洗脫綠原酸，將第1、2柱體積與后面8個(gè)柱體積的洗脫液分開(kāi)收集濃縮得兩部分綠原酸；之后用50％～70％乙醇洗脫總黃酮。經(jīng)過(guò)XDA-6樹(shù)脂分離后得到的總糖含量為50.35％，其固形物得率22.48％；京尼平苷酸含量為22.74％，其固形物得率為1.23％；綠原酸含量為32.06％，其固形物得率為3.97％；黃酮含量為29.89％，其固形物得率為4.44％。 4.將再生后的XDA-6樹(shù)脂按照上述的工藝方法，重復(fù)前面的步驟，取得再生樹(shù)脂

5、分離得到的杜仲葉中各有效成分的含量。再生樹(shù)脂和新樹(shù)脂分離得到的總糖、京尼平苷酸含量差別不大；而綠原酸含量則高于新樹(shù)脂，最高可達(dá)46.35％，比新樹(shù)脂高14.29％。由此可以看出XDA-6樹(shù)脂再生4次后，仍然可以進(jìn)行有效成分的分離純化，能夠達(dá)到反復(fù)利用，降低成本的目的。 通過(guò)本中試研究證明此工藝是可行的，并且省去萃取這一步，使工藝路線更加簡(jiǎn)單。 整個(gè)中試過(guò)程的物料消耗量為：提取分離6kg杜仲葉，需用．XDA-6樹(shù)脂20kg