侵染半夏的病毒檢測(cè)與大豆花葉病毒的分子系統(tǒng)學(xué)研究.pdf

1、對(duì)我國(guó)浙江、河南、山西、湖南、山東，湖北等半夏主產(chǎn)地的三葉半夏(Pinelliaternata(Thunb.)Breit.)進(jìn)行病毒檢測(cè)，并對(duì)分離所得的7個(gè)大豆花葉病毒(Soybeenmosaicvirus,SMV)進(jìn)行了核苷酸和氨基酸水平的分子系統(tǒng)學(xué)分析。 對(duì)收集的29個(gè)樣品進(jìn)行了黃瓜花葉病毒(Cucumbermosaicvirus,CMV)、芋花葉病毒(Dasheenmosaicvirus,DsMV)、SMV的DAS-ELI

2、SA檢測(cè)及分子生物學(xué)鑒定。在DAS-ELISA檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)SMV呈陽(yáng)性的樣品，均呈陽(yáng)性。為了進(jìn)一步確定該線狀病毒，用馬鈴薯Y病毒屬(Potyvirus)通用引物和CMV基因組RNA3全長(zhǎng)序列擴(kuò)增引物，通過(guò)RT-PCR方法擴(kuò)增出了CMV及Potyvirus的對(duì)應(yīng)片段。通過(guò)測(cè)序和序列比對(duì)進(jìn)一步確定其分別為CMV與SMV，而后者不是的DsMV，由此確定侵然我國(guó)半夏的病毒主要為SMV及CMV，我國(guó)三葉半夏普遍受到這兩種病毒的侵然侵染。其中CMV的

3、檢出率為48.2％；SMV的檢率42.4％；有些樣品還存在兩個(gè)病毒的復(fù)合侵然。通過(guò)SMV、CMV的CP的氨基酸水平序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)：相對(duì)來(lái)說(shuō)，SMV半夏分離物與SMV大豆分離物有較大的差異，同源性在80.1％-81.3％之間；CMV半夏分離物根據(jù)CP的分組屬于CMV組Ⅰ。 將SMV陽(yáng)性樣品進(jìn)一步研究測(cè)序，并將所得的7個(gè)SMV分離物的外殼蛋白CP基因與其他分離自大豆的SMV、分離自半夏的SMV、分離自其他天南星科植物的DsMV以及侵然

4、葫蘆科的西瓜花葉病毒(Watermelonmosaicvirus,WMV)對(duì)應(yīng)基因進(jìn)行了核苷酸和氨基酸水平的分子系統(tǒng)學(xué)分析。結(jié)果表明，SMVCP基因核苷酸同源序列具有較高的寄主相關(guān)性和部分地域相關(guān)性，而氨基酸同源序列的寄主相關(guān)性明顯高于地域相關(guān)性。侵染半夏的SMV的N端高度變異區(qū)是SMV普通株系和WMV基因重組的結(jié)果，在進(jìn)化中承受選擇壓力。CP保守區(qū)的氨基酸序列是決定蛋白功能的主要部分，其序列相似性很高，種間差異較小。本研究初步揭示了S