預(yù)防性應(yīng)用5-HT-,3-受體拮抗劑對(duì)內(nèi)臟痛高敏感幼鼠痛敏感性及結(jié)腸P物質(zhì)表達(dá)的影響.pdf

1、目的：采用行為學(xué)和電生理學(xué)評(píng)價(jià)方法，探討預(yù)防性應(yīng)用5-HT3受體拮抗劑對(duì)新生期反復(fù)結(jié)直腸刺激(Colorectal Irritation，CI)建立內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感性模型幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)敏感性影響；比較各組幼鼠結(jié)腸P物質(zhì)(substance P，SP)表達(dá)，探討結(jié)腸SP異常表達(dá)在幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏形成中作用，為臨床上采取有效防治措施及開(kāi)發(fā)治療藥物提供理論依據(jù)。
　　 方法：①32只SD新生大鼠按2×2析因設(shè)計(jì)分成4組，每組8只，A1B1

2、組：新生期反復(fù)CI，建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感模型，15～21d腹腔注射雷莫司瓊；A1B2組：新生期反復(fù)CI，建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感模型，15～21d腹腔注射生理鹽水；A2B1組：新生期未接受CI，15～21d腹腔注射雷莫司瓊；A2B2組：新生期未接受CI，15～21d腹腔注射生理鹽水。常規(guī)飼養(yǎng)到幼鼠期(6周齡)，通過(guò)觀察大鼠在不同壓力結(jié)直腸擴(kuò)張(ColorectalDistension，CRD)刺激后的腹壁撤退反射(AWR)評(píng)分、內(nèi)臟痛閾

3、和腹外斜肌放電測(cè)量進(jìn)行內(nèi)臟痛覺(jué)敏感性評(píng)價(jià)，選取降結(jié)腸進(jìn)行病理學(xué)檢查。②32只SD新生大鼠按2×2析因設(shè)計(jì)分成4組，每組8只，A1B1組：新生期反復(fù)CI，建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感模型，15～21d腹腔注射雷莫司瓊；A1B2組：新生期反復(fù)CI，建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感模型，15～21d腹腔注射生理鹽水；A2B1組：新生期未接受CI，15～21d腹腔注射雷莫司瓊；A2B2組：新生期未接受CI，15～21d腹腔注射生理鹽水。常規(guī)飼養(yǎng)到幼鼠期(6周齡

4、)，應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色及計(jì)算機(jī)圖像分析系統(tǒng)對(duì)結(jié)腸進(jìn)行積分光密度值半定量分析。采用SPSS13.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，α=0.05為顯著性檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)。
　　 結(jié)果：①幼鼠6周齡時(shí)，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感性模型可使痛閾降低，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感性模型的使AWR評(píng)分升高，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感性模型對(duì)于AWR評(píng)分的主效應(yīng)在各個(gè)CRD壓力下都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值分別是47.79、6.61、26.30、4.8

5、4，均P＜0.05)；預(yù)防性應(yīng)用雷莫司瓊對(duì)于AWR評(píng)分降低，預(yù)防性應(yīng)用雷莫司瓊對(duì)于AWR評(píng)分的主效應(yīng)在各個(gè)CRD壓力下也都有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值分別是23.74、11.88、4.74、4.20、4.76，均P＜0.05)。新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感性模型可使幼鼠腹外斜肌放電幅值在各個(gè)壓力下均升高，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感性模型對(duì)幼鼠腹外斜肌放電幅值主效應(yīng)在各不同CRD壓力下均有顯著意義(F值分別為9.00、6.50、8.99、

6、4.02、4.98，均P≤0.05)；降結(jié)腸未見(jiàn)明顯病理組織損傷。②幼鼠6周齡時(shí)，A1B2組中結(jié)腸黏膜層、粘膜下層、肌層內(nèi)均出現(xiàn)密集棕黃色免疫陽(yáng)性產(chǎn)物，SP陽(yáng)性細(xì)胞多;A1B1組、A2B1組及A2B2組，結(jié)腸黏膜層、粘膜下層、肌層內(nèi)僅有極少量SP陽(yáng)性細(xì)胞，免疫陽(yáng)性產(chǎn)物著色淺淡，SP積分光密度值A(chǔ)1B1組肌層大于粘膜下層、粘膜層，差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，A1B2、A2B1、A2B2組各層積分光密度值均未見(jiàn)明顯差別。進(jìn)一步對(duì)新生期CI及預(yù)防性應(yīng)用

7、雷莫司瓊對(duì)于幼鼠結(jié)腸各層積分光密度值的主效應(yīng)值進(jìn)行隨機(jī)區(qū)組的方差分析，結(jié)果表明：粘膜層與肌層的的SP積分光密度值差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.002)，粘膜下層與肌層的SP積分光密度值差別也有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.004)，粘膜層與粘膜下層的SP積分光密度值差別沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.139)；幼鼠結(jié)腸粘膜層、粘膜下層、肌層SP積分光密度值均受到新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感性模型和預(yù)防性應(yīng)用雷莫司瓊影響，新生期CI建立幼鼠內(nèi)臟痛覺(jué)高敏感性