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文檔簡介
1、目的檢測子宮肌瘤患者血小板源性生長因子(Platelet-Derived Growth Factor,PDGF)及其受體PDGFR-α和PDGFR-β在肌瘤組織及其病變周圍正常平滑肌組織中的表達(dá),比較在月經(jīng)周期不同時(shí)期它們表達(dá)的差異;研究PDGF對原代培養(yǎng)的子宮肌瘤細(xì)胞和肌瘤周圍正常平滑肌細(xì)胞增殖的影響以及對膠原蛋白表達(dá)的影響;探討PDGF在子宮肌瘤的發(fā)生發(fā)展中的作用,為從新的角度尋找治療和預(yù)防子宮肌瘤的途徑提供理論基礎(chǔ).方法1、收集2
2、1例因子宮肌瘤而行子宮切除術(shù)的手術(shù)標(biāo)本,采用免疫組織化學(xué)鏈霉親合素-生物素化過氧化物酶復(fù)合物法(SABC法)分別測定肌瘤組織及鄰近肌層組織中PDGF-A,PDGF-B、PDGFR-α和PDGFR-β的表達(dá)情況,通過計(jì)算機(jī)彩色圖文攝像分析系統(tǒng)分析其抗原表達(dá)的平均光密度.2、用基因重組人PDGF-AB(10ng/ml)作用于原代培養(yǎng)的子宮肌瘤細(xì)胞,以鄰近正常子宮肌層細(xì)胞作對照,用RT-PCR法從mRNA水平檢測在有無PDGF-AB作用下,細(xì)
3、胞增殖性核抗原(PCNA),前膠原α1多肽(Ⅰ、Ⅲ)表達(dá)的差異.3、將原代培養(yǎng)的子宮肌瘤細(xì)胞和鄰近正常子宮肌層細(xì)胞做細(xì)胞爬片,免疫組織化學(xué)法從蛋白質(zhì)水平檢測PDGF-AB(10ng/ml)干預(yù)下,PCNA的表達(dá)情況,通過計(jì)算機(jī)圖片攝像分析系統(tǒng)統(tǒng)計(jì)分析其抗原表達(dá)的平均光密度的差異.結(jié)論P(yáng)DGF及其受體在子宮肌瘤組織中局部的高表達(dá)可能與子宮肌瘤平滑肌細(xì)胞的高增殖狀態(tài)有關(guān);PDGF-BB的表達(dá)受月經(jīng)周期影響,可能做為主要因子參與到卵巢激素刺激
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