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文檔簡介
1、目的:機體的免疫系統(tǒng)是一個精密的反應(yīng)體系,免疫應(yīng)答的觸發(fā)、進展和平息受到免疫系統(tǒng)的精確調(diào)控。免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)機制研究是免疫學研究的重要分支,機體各器官微環(huán)境對免疫應(yīng)答的調(diào)節(jié)作用不容忽視。免疫應(yīng)答的主體是免疫細胞,而樹突狀細胞(dendritic cells,DC)作為專職抗原提呈細胞是免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié),因此研究機體器官微環(huán)境對樹突狀細胞生物學功能的影響具有重要理論價值和臨床意義。正常妊娠是一個復(fù)雜的生理過程,母體的免疫系統(tǒng)不排斥同種異基
2、因移植物的胚胎,且保護胚胎正常發(fā)育直至分娩,是機體免疫耐受建立的體現(xiàn),說明母體對胚胎存在著精細的免疫應(yīng)答和免疫調(diào)控機制,母胎耐受(maternal-fetal tolerance)的建立和維持是多種機制共同參與、互相制約、互相協(xié)調(diào)的動態(tài)平衡過程。本研究建立小鼠子宮蛻膜基質(zhì)細胞(decidual stroma cells,DSC)和小鼠骨髓來源的樹突狀細胞的細胞共培養(yǎng)體系,探討子宮蛻膜基質(zhì)細胞對樹突狀細胞增殖的影響。
方法:應(yīng)用
3、白細胞介素-4(IL-4)和粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)誘導(dǎo)小鼠的骨髓細胞分化為樹突狀細胞,利用流式細胞儀(FACS)檢測細胞表面分子和細胞增殖,利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測其分泌的細胞因子,構(gòu)建小鼠子宮蛻膜細胞和小鼠骨髓來源的樹突狀細胞共培養(yǎng)體系模型,動態(tài)觀察小鼠子宮蛻膜細胞和小鼠骨髓來源的樹突狀細胞增殖的影響。
結(jié)果:小鼠骨髓來源樹突狀細胞高表達CD11c,共刺激分子CD80和CD86,MHCⅡ類
4、分子Ia和MHCⅠ類分子H-2Kb。經(jīng)脂多糖(LPS)刺激的樹突狀細胞分泌細胞因子IL-12(p70)、IL-6、TNFα和IL-1β的水平明顯上調(diào)(P<0.05),并能夠促進抗原肽特異性T淋巴細胞增殖反應(yīng)能力(P<0.05)。在小鼠子宮蛻膜細胞和小鼠骨髓來源的樹突狀細胞共培養(yǎng)10天后觀察到小鼠子宮蛻膜細胞明顯促進小鼠骨髓來源的樹突狀細胞增殖。
結(jié)論:成功構(gòu)建小鼠子宮蛻膜基質(zhì)細胞和小鼠骨髓來源的樹突狀細胞共培養(yǎng)體系。驗證了樹突
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