負載脊髓勻漿蛋白的樹突狀細胞促進小鼠脊髓損傷功能恢復(fù)的作用.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文負載脊髓勻漿蛋白的樹突狀細胞促進小鼠脊髓損傷功能恢復(fù)的作用姓名：劉明永申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（骨外）指導(dǎo)教師：趙建華20080501第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文軸突順行示蹤，辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase，HRP)軸突逆行示蹤，結(jié)合IHC檢測膠質(zhì)瘢痕與軸突、囊腔的關(guān)系。結(jié)果1各組小鼠在傷后均出現(xiàn)完全性截癱，1w左右BBB評分逐漸恢復(fù)。其中，hpDCs組小鼠恢復(fù)最快，于28dpi進入

2、平臺期，BBB評分高達14O2O，最終達到16321，顯著高于DCs組(10020)和hp組(10418)p001)。腹腔注射和局部注射BBB評分結(jié)果無統(tǒng)計學(xué)差異。2HE染色顯示各組損傷局部均出現(xiàn)反應(yīng)性膠質(zhì)瘢痕增生，空洞形成。但是，hpDCs組損傷局部空洞范圍與DCs、hp組比較具有顯著統(tǒng)計學(xué)差異pO01)，損傷范圍及膠質(zhì)瘢痕厚度與DCs組具有統(tǒng)計學(xué)差異pO05)。3IHC染色發(fā)現(xiàn)，脊髓損傷的囊腔周圍GFAP表達的星形膠質(zhì)細胞肥大增生，

3、突起豐富，構(gòu)成膠質(zhì)瘢痕的主要成分。與其它二組相比，hpDCs組GFAP表達出現(xiàn)較慢，且GFAP細胞分布較稀疏；hpDCs組，Nestin細胞在注射后56dpi仍可見，而其它二組在注射后28dpi基本消失；NF表達可以明確地觀察到損傷后軸突分布的情況，各組無顯著區(qū)別。4各組中，BDA順行示蹤與HRP逆行示蹤觀察到軸突終止于膠質(zhì)瘢痕外，未到達囊腔內(nèi)。結(jié)論1本實驗制備的小鼠脊髓鉗夾傷模型，造成脊髓嚴重不完全損傷，其病理過程和臨床接近，能夠模擬

4、臨床自然病程，符合實驗要求。2局部或腹腔注射hpDCs，能夠顯著促進小鼠SCI神經(jīng)功能恢復(fù)，而hp具有相對較弱的促進作用，單純DCs效果最差。3腹腔注射和局部注射具有同樣效果，表明hpDCs是通過全身性的系統(tǒng)免疫起作用。4hpDCs可以延緩局部膠質(zhì)瘢痕形成，降低膠質(zhì)瘢痕密度和厚度，縮小局部空洞及損傷部位面積，提示可以降低膠質(zhì)瘢痕對神經(jīng)再生的屏障作用；可以延長局部Nestin表達，提示可以增加局部存在的內(nèi)源性再生能力。5免疫組織化學(xué)熒光雙