小鼠脊髓損傷后Aβ蛋白的表達(dá)與細(xì)胞凋亡.pdf

1、脊髓損傷(spinal cord injury，SCI)在骨科損傷中非常常見，屬于致殘率相對比較高的中樞神經(jīng)系統(tǒng)方面的損傷。脊髓損傷之所以是一個(gè)棘手的問題主要由于其三大特點(diǎn):發(fā)生率高、致殘率高和手術(shù)耗費(fèi)高。能夠造成脊髓損傷的原因有很多種，主要原因包括交通事故、槍傷、暴力事件、高空墜物、體育事故等。根據(jù)近幾年的調(diào)查數(shù)據(jù)顯示，脊髓損傷發(fā)生率一直居高不下，甚至還有增高的趨勢。脊髓損傷已經(jīng)成為一道擺在我們面前的難題，所以加強(qiáng)脊髓損傷相關(guān)方面的基

2、礎(chǔ)研究、對臨床救治、康復(fù)具有重要的意義。截止目前這方面的研究尚不是非常清楚。
　　脊髓損傷后會(huì)發(fā)生一系列的病理損傷，大致可以分為兩類:原發(fā)性損傷和繼發(fā)性損傷。原發(fā)性損傷是指外力產(chǎn)生的撞擊、壓迫造成的直接性的損傷。繼發(fā)性損傷主要是指在原發(fā)性損傷之后出現(xiàn)的一些病理改變，也是細(xì)胞病變的過程，如局部的缺血缺氧導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)、過氧化物和自由基的產(chǎn)生、細(xì)胞外的Ca2+增多、能量代謝和微循環(huán)的改變、一些神經(jīng)毒性作用的氨基酸的釋放等，甚至引起細(xì)胞

3、的壞死、凋亡。脊髓損傷之后首先出現(xiàn)局部淤血，微循環(huán)遭到破壞，形成壞死腔隙，脊髓組織發(fā)生軟化，甚至出現(xiàn)脊髓空洞，這些都能使傷后脊髓功能的恢復(fù)受到影響。脊髓損傷在分子水平上的機(jī)制比較復(fù)雜，損傷之后細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生一些有益的細(xì)胞因子和化學(xué)因子支持細(xì)胞生存，對組織存活、細(xì)胞再生、神經(jīng)修復(fù)有很大幫助。還有一些有害的因子能夠損害組織，阻礙細(xì)胞存活，促進(jìn)細(xì)胞凋亡。研究發(fā)現(xiàn)Aβ在脊髓損傷后促進(jìn)細(xì)胞凋亡方面起到了很大的作用。
　　目的:觀察小鼠急性脊髓損

4、傷后不同時(shí)間點(diǎn)Aβ蛋白的變化與細(xì)胞凋亡的情況，進(jìn)一步了解脊髓損傷后相關(guān)的病理生理變化。
　　方法:130只昆明(KM)小鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(operation group)60只、假手術(shù)組（sham group）60只、空白組(negative control group)10只。實(shí)驗(yàn)組和假手術(shù)組均在脊髓胸8至胸12節(jié)段打開椎板，暴露脊髓。實(shí)驗(yàn)組采用改良Allen法打擊脊髓后縫合傷口;假手術(shù)組打開椎板暴露脊髓后直接縫合。實(shí)驗(yàn)組和假手

5、術(shù)組分別于2h、12h、24 h、3d、7d、14d六個(gè)時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)選取5只進(jìn)行模型制作，脊髓損傷部位取材，空白組選取5只，直接取同樣節(jié)段脊髓，免疫組化學(xué)方法觀察Aβ蛋白與凋亡細(xì)胞的表達(dá)變化。同樣方法各選取5只用Westernblot方法檢測脊髓Aβ蛋白表達(dá)變化。
　　結(jié)果:脊髓損傷后實(shí)驗(yàn)組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的Aβ蛋白含量和陽性細(xì)胞數(shù)量較假手術(shù)組各時(shí)間點(diǎn)和對照組明顯增加，實(shí)驗(yàn)組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的Aβ蛋白含量和陽性細(xì)胞數(shù)量隨時(shí)間的增加而增加，3-7