褪黑素和神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白-1對(duì)脊髓損傷C57BL-6小鼠功能恢復(fù)的作用.pdf

1、目的:脊髓損傷不僅對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)通路造成損傷，而且會(huì)導(dǎo)致?lián)p傷部位膠質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生巨大變化，從而形成膠質(zhì)瘢痕阻礙脊髓損傷后神經(jīng)功能的恢復(fù)。神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白-1（NeureguIin-1，Nrg1）最初作為一類神經(jīng)調(diào)節(jié)因子，其在神經(jīng)損傷修復(fù)中有一定的作用，而許多實(shí)驗(yàn)證實(shí)褪黑素（Melatonin，MT）在對(duì)實(shí)驗(yàn)性脊髓損傷具有很強(qiáng)的神經(jīng)保護(hù)作用。本課題研究Nrg1和MT對(duì)脊髓損傷修復(fù)相關(guān)分子表達(dá)的影響，探討Nrg1和MT能否限制過(guò)度的星形膠質(zhì)細(xì)胞

2、反應(yīng)，在脊髓損傷后的再生、修復(fù)以及神經(jīng)功能恢復(fù)中發(fā)揮作用，以及比較Nrg1和MT聯(lián)合給藥治療脊髓損傷和單獨(dú)給藥治療脊髓損傷的效果。
　　方法:3月齡C57BL/6雌性小鼠經(jīng)過(guò)壓迫性脊髓損傷后，隨機(jī)分成四組，每組6只，通過(guò)鼠尾靜脈注射分別連續(xù)給予DMSO溶劑、重組Nrg1β、MT和重組Nrg1β+MT7天，正常飼養(yǎng)6周后取其損傷部位脊髓樣本。通過(guò)免疫組織化學(xué)、western blot和免疫熒光研究脊髓損傷相關(guān)分子的表達(dá)和細(xì)胞定位。<

3、br>　　結(jié)果:
　　1.Western blot結(jié)果顯示：與DMSO溶劑對(duì)照組相比，各實(shí)驗(yàn)組神經(jīng)再生相關(guān)分子mTOR和Bcl-2表達(dá)顯著升高(p<0.05)；而不利于損傷后修復(fù)分子PTEN、GFAP和Bax的表達(dá)下降，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。另外，在免疫組化和免疫熒光的實(shí)驗(yàn)結(jié)果中也表現(xiàn)出同樣的趨勢(shì)。
　　2.行為學(xué)評(píng)分：脊髓損傷后當(dāng)天，各組小鼠雙后肢運(yùn)動(dòng)能力明顯受限，BMS評(píng)分達(dá)到最低分0分。脊髓損傷給藥后第二周開(kāi)始，DMSO溶劑組

4、、Nrg1組、MT組和Nrg1+MT組各組小鼠雙后肢的運(yùn)動(dòng)能力出現(xiàn)不同程度的恢復(fù)。其中，與DMSO溶劑組相比，Nrg1+MT組恢復(fù)無(wú)明顯好轉(zhuǎn)，BMS評(píng)分1-2分；而Nrg1組和MT組恢復(fù)較好，BMS評(píng)分4-5分。
　　結(jié)論:
　　1.Nrg1和MT能夠抑制脊髓損傷后星型膠質(zhì)瘢痕的形成和細(xì)胞凋亡；
　　2.Nrg1和MT通過(guò)激活神經(jīng)再生相關(guān)分子和抑制不利于損傷后修復(fù)分子的表達(dá)，對(duì)脊髓損傷后神經(jīng)功能的再生和恢復(fù)起到一定作用