辣椒堿預(yù)防C57BL-6小鼠膽囊膽固醇結(jié)石形成及其作用機(jī)制研究.pdf

1、膽囊結(jié)石病(Gallstone，GS)是一種由膽囊膽汁代謝異常引起的疾病，膽囊膽固醇結(jié)石為其主要的臨床癥狀。當(dāng)前治療膽囊膽固醇結(jié)石最有效的手段是手術(shù)，但手術(shù)治療為有創(chuàng)治療，會(huì)導(dǎo)致體內(nèi)部分的器官缺失和消化功能的下降，改變生理解剖結(jié)構(gòu)，并有可能引起膽汁反流。因此，探究膽囊膽固醇結(jié)石的發(fā)病原因，了解其形成機(jī)制，對(duì)膽囊膽固醇結(jié)石的預(yù)防及治療有非常重要的意義。
　　辣椒堿作為辣椒的主要活性成分，目前有研究表明，它具有多種生理功能，能減少脂肪

2、聚集，減低血壓，使心血管得到一定保護(hù)，還可以促進(jìn)新陳代謝、加快能量消耗，及降低膽固醇。辣椒堿是TRPV1的激動(dòng)劑，能夠降低膽固醇代謝過程中的關(guān)鍵限速酶HMG-CoA還原酶，還具有上調(diào)肝臟中CYP7A1表達(dá)和促進(jìn)膽固醇向膽汁酸的轉(zhuǎn)化的作用。辣椒堿還具有一定的抗炎作用。但是，目前有關(guān)辣椒堿預(yù)防膽囊膽固醇結(jié)石的研究還未見報(bào)道，其作用效果也不明確，作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。
　　目的：
　　本課題旨在建立由高脂飼料誘發(fā)C57BL/6小

3、鼠膽囊膽固醇結(jié)石的動(dòng)物模型，并以此為基礎(chǔ)研究辣椒堿對(duì)于膽囊膽固醇結(jié)石的預(yù)防及治療機(jī)理，為辣椒堿成為一種新的、有潛力的預(yù)防膽囊膽固醇結(jié)石病的藥物提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：
　　選取雄性C57BL/6小鼠30只，隨機(jī)分為三組，分別喂養(yǎng)飼料:對(duì)照組為標(biāo)準(zhǔn)飼料，模型組為標(biāo)準(zhǔn)飼料+致石飼料，治療組為標(biāo)準(zhǔn)飼料+致石飼料+辣椒堿。喂養(yǎng)8周后，檢測各組小鼠血清中甘油三酯、總膽固醇、高密度脂蛋白及低密度脂蛋白的含量。偏振光顯微鏡觀察各組膽囊膽

4、汁膽固醇結(jié)晶情況。
　　采用免疫組化的方法分別檢測各組膽囊壁組織COX-2、MUC5AC、TRPV1表達(dá)情況;并檢測肝臟組織CYP7A1、HMG-CoA還原酶、TRPV1表達(dá)情況。運(yùn)用組織病理學(xué)檢查的方法觀察膽囊粘膜炎癥程度。并通過Western-Blotting的方法檢測肝臟組織中CYP7A1、HMG-CoA還原酶、TRPV1表達(dá)量。
　　結(jié)果：
　　1、三組小鼠成石率分別為對(duì)照組(0％)、模型組(100％)和治療組

5、(20％)。利用偏振光顯微鏡觀察三組小鼠的膽囊，模型組可以看到較多具有明顯特征的膽固醇晶體產(chǎn)生，對(duì)照組并沒有出現(xiàn)。而治療組僅在小鼠膽囊內(nèi)偶見散在膽固醇結(jié)晶。
　　2、與對(duì)照組小鼠相比，模型組小鼠血清中總膽固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白含量均有顯著增高，而高密度脂蛋白的含量卻有下降。治療組小鼠與模型組小鼠相比，顯著降低的是血清中低密度脂蛋白、總膽固醇、甘油三酯的含量。而顯著升高的是高密度脂蛋白含量。對(duì)比模型組小鼠，治療組小鼠膽囊病理炎

6、癥癥狀明顯減輕。
　　3、相對(duì)于對(duì)照組，COX-2及MUC5AC在模型組中的表達(dá)明顯增強(qiáng)，而TRPV1的表達(dá)明顯降低，治療組中COX-2及MUC5AC的表達(dá)明顯降低，而TRPV1的表達(dá)明顯升高。肝臟組織CYP7A1及TRPV1的表達(dá)在模型組中明顯降低，而HMG-CoA還原酶的表達(dá)明顯升高，在治療組中肝臟組織CYP7A1及TRPV1的表達(dá)明顯升高，而HMG-CoA還原酶的表達(dá)明顯降低。
　　結(jié)論：
　　1、本研究中采用高