模擬海拔5000米高原低氧環(huán)境對雄性C57BL-6小鼠內(nèi)分泌和認(rèn)知功能的影響.pdf

1、中國南極昆侖站(80025＇01″S，77006＇58″E)位于南極冰穹A最高點(diǎn)，海拔4087米，年平均氣溫-58.4℃，氧分壓比海平值減少約40％左右，相當(dāng)于中低緯度高原近5000米水平，具有低氧復(fù)合高寒的環(huán)境特點(diǎn)。本課題組前期研究結(jié)果表明冰穹A低氧復(fù)合高寒環(huán)境對南極冰蓋考察隊(duì)員血清的下丘腦一垂體一甲狀腺軸激素水平、促紅細(xì)胞生成素含量(EPO)及認(rèn)知能力均有顯著影響。為探討冰蓋考察隊(duì)員在極端環(huán)境下生理和心理的變化機(jī)制，本論文進(jìn)行了模擬

2、海拔5000米高原低氧環(huán)境下雄性C57BL/6小鼠的甲狀腺與腎臟形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的變化，以及認(rèn)知能力改變的研究，為南極冰蓋考察隊(duì)員的醫(yī)學(xué)防治提供依據(jù)。
　　 采用低壓低氧艙模擬海拔5000米高原低氧環(huán)境復(fù)制動物模型，將小鼠分為常氧對照組和對應(yīng)的低氧組：3天、7天、14天和28天組。用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)評價小鼠的空間學(xué)習(xí)和記憶能力；用HE染色、免疫組化和WestemBlot方法，觀察甲狀腺和腎組織的形態(tài)和結(jié)構(gòu)變化，對合成甲狀腺

3、激素的關(guān)鍵酶甲狀腺過氧化物酶(TPO)和基礎(chǔ)蛋白甲狀腺球蛋白(TGB)，低氧調(diào)節(jié)的低氧誘導(dǎo)因子HIF-1α和HIF-2α進(jìn)行細(xì)胞定位和蛋白定量分析；用ELISA方法測定小鼠血清FT3、FT4、TSH和EPO水平。
　　 第一部分：模擬海拔5000米高原低氧環(huán)境對雄性C57BL/6小鼠甲狀腺功能和認(rèn)知能力的影響
　　 1、低氧組小鼠體重均顯著低于對照組(P＜0.05）。
　　 2、Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與

4、對照組比，低氧組小鼠的尋臺潛伏期在3天和28天延長，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 3、低氧組小鼠血清下丘腦一垂體一甲狀腺軸激素FT3、FT4和TSH的水平無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 4、HE染色結(jié)果顯示，各低氧組小鼠腺泡存在異型性：腺泡大小不一，腔內(nèi)充滿不同密度的膠體，腺泡上皮細(xì)胞形態(tài)不同，包括扁平狀、立方狀或高柱狀。與對照組比，立方狀或高柱狀較多，細(xì)胞增生明顯。
　　 5、免疫組化結(jié)果顯示，對照和低氧組小鼠甲狀腺組織內(nèi)均有

5、HIF-1α和HIF-2α陽性表達(dá)，主要集中在小腺泡內(nèi)。
　　 6、WestemBlot結(jié)果顯示，低氧組小鼠TGB總體水平低于對照組，在7天(p=0.016)和28天(p=0.044)表達(dá)有顯著差異。TPO僅在28天高于對照組(p=0.015)，其余時間點(diǎn)均低于對照組且無顯著性差異。對照組和低氧組甲狀腺組織中均可見HIF-1α和HIF-2α蛋白陽性表達(dá)，HIF-2α蛋白表達(dá)弱于HIF-1α(p＜0.01)。
　　 第二部

6、分：模擬海拔5000米高原低氧環(huán)境對雄性C57BL/6小鼠促紅細(xì)胞生成素水平的影響
　　 1、隨著低氧暴露時間的延長，低氧組小鼠血清EPO均顯著低于對照組（p＜0.05），14天達(dá)到最低，28天回升。
　　 2、EPO主要在腎臟中合成。腎HE染色結(jié)果顯示，低氧組小鼠的腎小管上皮細(xì)胞發(fā)生水樣變性，官腔狹窄以致消失。系膜細(xì)胞及基質(zhì)增生，腎小球囊狹窄，球囊間隙消失，間質(zhì)水腫。
　　 3、免疫組化結(jié)果顯示，對照和低氧組小

7、鼠腎組織EPO和HIF-1α主要在腎髓質(zhì)部腎小管細(xì)胞內(nèi)表達(dá)，腎皮質(zhì)部腎小球內(nèi)皮細(xì)胞和系膜細(xì)胞幾乎無陽性表達(dá)。
　　 4、WestemBlot結(jié)果顯示，低氧組腎組織EPO在7天表達(dá)顯著高于對照組(p=0.024)，14天表達(dá)顯著低于對照組(p=0.001)。而低氧組腎組織HIF-1α在7天(p=0.03）和28天(p=0.001)均顯著高于對照組。
　　 5、低氧組腎組織內(nèi)HIF-1α的表達(dá)分布與EPO的細(xì)胞定位有部分重疊

8、，但HIF-1α對EPO的具體調(diào)節(jié)機(jī)制還需深入研究。
　　 目的：監(jiān)測中國南極冰蓋考察預(yù)選隊(duì)員心血管系統(tǒng)隨海拔增高的變化，探討篩查低氧易感隊(duì)員和急性高原病的防治。
　　 方法：用無創(chuàng)血流動力學(xué)監(jiān)護(hù)儀和十二導(dǎo)聯(lián)心電圖機(jī)，在北京(40m)、拉薩(3650m)、羊八井(4300m)對第25次和26次南極冰蓋考察預(yù)選隊(duì)員心血管功能進(jìn)行連續(xù)動態(tài)性監(jiān)測。
　　 結(jié)果：隨著海拔的增高，心率、收縮壓、舒張壓、平均動脈壓、外周血管