氯氮平對雄性C57BL-6小鼠糖、脂代謝及其骨骼肌PPAR-γ mRNA表達(dá)的影響.pdf

1、一、目的： 研究不同劑量氯氮平對雄性C57BL/6小鼠體重、血糖、葡萄糖耐量、血脂及胰島素水平的影響，然后采用分子生物學(xué)的方法從基因水平深入研究氯氮平對小鼠骨骼肌過氧化物酶體增殖物激活受體-r(PPAR-r)mRNA表達(dá)的影響，旨在探明氯氮平致糖、脂代謝異常的可能藥理作用機(jī)制。 二、方法： 1．動物分組與模型制作根據(jù)實(shí)驗(yàn)前小鼠體重和空腹血糖值，將60只雄性C57BL/6小鼠進(jìn)行隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，分為空白對照組、2.0

2、 mg·kg-1氯氮平組和10.0mg·kg-1氯氮平組共計(jì)3組，每組20只，按每籠10只喂養(yǎng)。各組小鼠每日腹腔注射空白溶媒或氯氮平注射液1次，連續(xù)注射28 d。 2．測定指標(biāo)和生物樣本的采集于給藥前(0d)、給藥后第7、14、21、28 d分別測定各組小鼠體重；連續(xù)腹腔注射給藥28 d后禁食過夜，于試驗(yàn)的第29 d早晨測定空腹血糖并進(jìn)行葡萄糖耐量試驗(yàn)，隨后再禁食6 h，用戊巴比妥鈉(130 mg·kg-1)麻醉小鼠，摘除小鼠眼

3、球取血，分離血漿，-20℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆糜跍y定小鼠血脂(TG、TC、HDL-C和LDL-C)、胰島素含量及計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)；同時迅速提取出小鼠股四頭肌置凍存管中，立即投入液氮中冷凍，后放入-70℃冰箱保存待測。 3．生物樣本的測定方法血糖用強(qiáng)生穩(wěn)豪血糖儀測定；血脂(TG、TC、HDL-C和LDL-C)采用7600-020 HITACHI自動生化儀測定；血漿胰島素含量測定采用體外放射免疫試劑盒。 小鼠骨骼肌中PPAR-

4、γ mRNA表達(dá)水平的測定采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)的方法檢測。 三、結(jié)果： 1．氯氮平對小鼠體重的影響在整個實(shí)驗(yàn)期間空白對照組小鼠體重逐漸增加；與空白對照組相比，在給藥后第14、21及28 d，2.0 mg·kg-1氯氮平組小鼠體重減少，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；10.0 mg·kg-1氯氮平組小鼠體重下降明顯(P<0.05)。 2．氯氮平對小鼠空腹血糖、葡萄糖耐量、血脂及胰島素的影響腹腔注射氯氮平28

5、 d后，與空白對照組相比，2.0 mg·kg-1氯氮平組空腹血糖、胰島素水平及胰島素抵抗指數(shù)升高，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，其葡萄糖耐量及血脂(TG、TC、HDL-C和LDL-C)幾乎無變化。10.0mg·kg-1氯氮平組空腹血糖、血糖曲線下面積(AUC(BG))、胰島素水平及胰島素抵抗指數(shù)顯著增加(p<0.05)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)明顯下降(p<0.05)，但其TG、TC和LDL-C幾乎無變化。 3.氯氮平對小鼠骨骼肌

6、PPAR-γ mRNA表達(dá)量的影響各組小鼠骨骼肌均有PPAR-γmRNA的表達(dá)；與空白對照組相比，腹腔注射氯氮平28d后，氯氮平各劑量組(2.0mg.kg·-1、10.0mg·kg-1)小鼠骨骼肌PPAR-γ mRNA表達(dá)量均有減少，但各組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（p>0.05)。 四、結(jié)論： 1.長期腹腔注射給予氯氮平(10.0 mg·kg-1)可使雄性C57BL/6小鼠血糖、胰島素水平升高，體重、HDL-C降低以及誘發(fā)胰島