我國(guó)重要蚊蟲(chóng)感染和傳播西方馬腦炎病毒的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、西方馬腦炎病毒(western equine encephalomyelitis virus，WEEV)屬于披膜病毒科(Togaviridae)甲病毒屬(Alphaviruses)。它能夠引起人類(lèi)和馬等動(dòng)物的致死性疾病——腦炎，對(duì)馬的病死率可達(dá)50％，對(duì)人的病死率最高可達(dá)10％，嬰幼兒患者常會(huì)導(dǎo)致智力低下、行為失常等。目前已知該病主要分布于加拿大、美國(guó)西部和中部、墨西哥、圭亞那、巴西、阿根廷、秘魯、智利和烏拉圭等國(guó)家。該病在北美地區(qū)呈地

2、方性流行，以不規(guī)則的間隔在馬和人群中引起流行。環(huán)跗庫(kù)蚊(Culex tarsalis)已被證明是北美地區(qū)西方馬腦炎病毒的主要傳播媒介，同時(shí)血清學(xué)調(diào)查證明了鳥(niǎo)類(lèi)在病毒循環(huán)中的作用。在自然界中，病毒只在野鳥(niǎo)—蚊之間進(jìn)行傳播，主要是在環(huán)跗庫(kù)蚊與野鳥(niǎo)之間；人和馬是其非固有的感染對(duì)象，稱(chēng)為“終末宿主”。此外，經(jīng)證實(shí)能夠自然或?qū)嶒?yàn)室感染W(wǎng)EEV的還有其它庫(kù)蚊屬(Culex)、按蚊屬(Anopheles)、伊蚊屬(Aedes)等7個(gè)屬20多種蚊蟲(chóng)，也

3、有從虱、蜱、螨等節(jié)肢動(dòng)物體內(nèi)分離病毒的報(bào)道。雖然西方馬腦炎只在美洲大陸上發(fā)生，但其仍然是國(guó)際嚴(yán)密監(jiān)控的人畜共患傳染病。除了美洲以外，波蘭和前蘇聯(lián)也曾報(bào)道從正常人血中測(cè)得西方馬腦炎抗體，1962年首次從俄羅斯分離出西方馬腦炎病毒株Y62-33。我國(guó)1990年分別從新疆烏蘇縣的一組赫坎按蚊(Anopheleshyrcanus)和博樂(lè)縣的全溝硬蜱(Ixodes persulcatus)中分離出WEEV，這是在歐亞大陸除俄羅斯外發(fā)現(xiàn)的第二例WE

4、EV分離的報(bào)道。在對(duì)我國(guó)人體血清學(xué)調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，WEEV抗體陽(yáng)性率為2.71％。這些情況都表明了WEEV在我國(guó)的存在。近年來(lái)我國(guó)每年均有大量不明原因發(fā)熱及腦炎病例的報(bào)道，提示W(wǎng)EEV可能是我國(guó)感染性疾病的新病原之一。此外，WEEV被列為二類(lèi)生物恐怖試劑，如果WEEV經(jīng)氣溶膠方式撒布后，當(dāng)?shù)氐乃拗鲃?dòng)物如鳥(niǎo)類(lèi)等被感染，那么易感蚊蟲(chóng)就有可能通過(guò)吸血將西方馬腦炎傳播給人類(lèi)，造成更大范圍的傳染病暴發(fā)。因此針對(duì)WEEV對(duì)我國(guó)潛在的威脅，我們首先需要明

5、確在我國(guó)的一些優(yōu)勢(shì)種蚊蟲(chóng)能否感染和傳播WEEV，了解它們對(duì)WEEV的傳播能力，結(jié)合生態(tài)習(xí)性確定哪些是主要的潛在媒介，以便制訂應(yīng)對(duì)一旦西方馬腦炎暴發(fā)后的相應(yīng)的防治策略。 在我國(guó)，淡色庫(kù)蚊(Cx．p. pallens)和致倦庫(kù)蚊(Cx．p. quinquefasciatus)是尖音庫(kù)蚊復(fù)合組(Cx．pipiens Complex)成員，嗜吸人血，兼吸禽血，是我國(guó)城鎮(zhèn)的優(yōu)勢(shì)蚊種；白紋伊蚊(Ae．a(chǎn)lbopictus)和埃及伊蚊(Ae．

6、aegypti)是登革熱的主要傳播媒介，也是我國(guó)的重要蚊種；三帶喙庫(kù)蚊(Cx．tritaeniorhynchus)廣泛地分布于我國(guó)水稻種植區(qū)，嗜吸畜血，兼吸人、雞血等。本研究以這幾種在我國(guó)十分重要的蚊種為對(duì)象，在實(shí)驗(yàn)室條件下，通過(guò)蚊蟲(chóng)叮咬人工感染W(wǎng)EEV的來(lái)亨雞，采用免疫熒光檢測(cè)病毒抗原和RT-PCR檢測(cè)病毒核酸等方法檢測(cè)蚊蟲(chóng)體內(nèi)病毒，確定受試蚊蟲(chóng)對(duì)WEEV的易感性和傳播能力；探討蚊蟲(chóng)對(duì)WEEV的易感機(jī)制，為進(jìn)一步深入理解病毒與媒介的相

7、互作用，尋求對(duì)病媒蚊蟲(chóng)的有效防控手段提供科學(xué)依據(jù)。本工作主要結(jié)果如下： 1．我國(guó)重要蚊種對(duì)WEEV的經(jīng)口感染率在實(shí)驗(yàn)室條件下，叮咬人工感染W(wǎng)EEV的來(lái)亨雞后，淡色庫(kù)蚊、致倦庫(kù)蚊、三帶喙庫(kù)蚊、白紋伊蚊和埃及伊蚊對(duì)WEEV均易感，其感染率分別為45.5％、60.0％、80.0％、36.7％和25.0％，不同蚊種之間的感染率有顯著性差異(x<'2>=13.709，P=0.008)，其中三帶喙庫(kù)蚊感染率最高，為80.0％。 2．

8、我國(guó)重要蚊種對(duì)WEEV的刺叮傳播率在實(shí)驗(yàn)室條件下，淡色庫(kù)蚊、致倦庫(kù)蚊、白紋伊蚊和埃及伊蚊都能通過(guò)刺叮吸血將體內(nèi)的WEEV傳播給易感動(dòng)物1～3日齡的來(lái)亨雞，傳播率分別為40.74％、53.13％、57.14％和45.16％，不同蚊種之間的傳播率沒(méi)有顯著性差異(x<'2>=1.879，P=0.598)。 3．WEEV在蚊蟲(chóng)體內(nèi)的散布率在實(shí)驗(yàn)室條件下，WEEV在已感染的淡色庫(kù)蚊、致倦庫(kù)蚊、三帶喙庫(kù)蚊、白紋伊蚊和埃及伊蚊體內(nèi)均能擴(kuò)散至足

9、，散布率分別為60.0％、61.1％、75.0％、54.5％和50.0％。不同蚊種間的散布率沒(méi)有顯著性差異(x<'2>=1.229，P=0.873)。 4．WEEV在感染蚊蟲(chóng)體內(nèi)擴(kuò)散與蚊蟲(chóng)經(jīng)口傳播病毒的相關(guān)性研究本研究通過(guò)對(duì)感染和傳播實(shí)驗(yàn)中的單只蚊蟲(chóng)進(jìn)行標(biāo)記，根據(jù)它們感染、擴(kuò)散和傳播的結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)，感染病毒并擴(kuò)散至足的絕大多數(shù)蚊蟲(chóng)能夠?qū)⒉《緜鞑ソo易感動(dòng)物、也有極少數(shù)不能經(jīng)口傳播；一些感染病毒但未擴(kuò)散至足的蚊蟲(chóng)也是一部分能

10、夠經(jīng)口傳播而另一部分不能；還存在一些體內(nèi)檢測(cè)不出病毒，其叮咬的來(lái)亨雞卻能被感染。 5．西方馬腦炎病毒抗原在經(jīng)口感染淡色庫(kù)蚊體內(nèi)的分布淡色庫(kù)蚊在經(jīng)口感染W(wǎng)EEV 3～4天后，部分蚊蟲(chóng)中腸壁見(jiàn)有WEEV的侵染。個(gè)別蚊蟲(chóng)后腸出現(xiàn)陽(yáng)性斑塊；第7～10d，部分蚊蟲(chóng)中腸、馬氏管、卵巢、后腸均見(jiàn)病毒侵染；第10～14d，除中腸和卵巢等呈陽(yáng)性反應(yīng)外；可見(jiàn)唾液腺亦被病毒侵染；但有些蚊蟲(chóng)個(gè)體僅在中腸有陽(yáng)性反應(yīng)，其它組織器官均為陰性；還有部分蚊蟲(chóng)個(gè)體