針灸對CTX化療小鼠骨髓造血細胞PCNA、Ki-67蛋白表達的影響.pdf

1、目的：本課題采用昆明種小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺(CTX)造成骨髓抑制、白細胞減少模型。通過對外周血白細胞計數(shù)、骨髓有核細胞增殖性核抗原PCNA(Proliferating Cell Nuclear Antigen)、Ki-67的蛋白表達的檢測，從分子生物學的角度揭示針灸保護造血干細胞、減輕骨髓抑制、提高白細胞數(shù)量與PCNA、Ki-67蛋白表達的關系，并初步探討了針刺與艾灸作用環(huán)節(jié)的差異。 方法：通過給小鼠注射化療藥物環(huán)磷酰胺(CTX

2、)造成骨髓抑制、白細胞減少模型。方法如下：將小鼠按體重、白細胞計數(shù)隨機分為針刺組、艾灸組、模型組、正常組。正常組按100mg/kg/d腹腔注射生理鹽水，其余各組小鼠按100mg/kg/d腹腔注射環(huán)磷酰胺，連續(xù)3天，從造模后4小時給予針刺和艾灸治療，選取“大椎”、“膈俞”、“腎俞”、“足三里”等穴位。在治療的第3天和第6天各處死一批小鼠取材，鏡檢外周血白細胞計數(shù)，’免疫組化法檢測骨髓有核細胞增殖相關蛋白PCNA、ki-67的表達。

3、 結果： 1.造模后CTX小鼠外周血白細胞計數(shù)動態(tài)變化：造模后，與正常組比，針刺組、艾灸組和模型組小鼠白細胞明顯下降，有顯著性差異。與模型組比，第2天、第3天針刺組、艾灸組無顯著差異，說明針刺組、艾灸組和模型組間的白細胞計數(shù)變化趨勢是一致的。 2.針灸對CTX化療小鼠白細胞的影響：第3天：與模型組相比，針刺組、艾灸組白細胞數(shù)增加，沒有顯著差異，且都在正常水平以下；第6天：模型組低于正常組，針刺組、艾灸組高于正常組，與模型

4、組比針刺組、艾灸組升高，有顯著性差異。總之，與模型組比，針刺組、艾灸組的白細胞數(shù)量均顯著提高，說明針灸可以提高CTX化療小鼠白細胞的數(shù)量，且第6天優(yōu)于第3天。 3.針灸對CTX化療小鼠骨髓有核細胞PCNA蛋白表達的影響：第3天，模型組高于正常組；艾灸組高于模型組，有顯著性差異，針刺組高于模型組，無顯著性差異，艾灸組優(yōu)于針刺組。第6天，模型組高于正常組，與模型組比針刺組、艾灸組升高，有顯著性差異；針刺組與艾灸組比無顯著性差異。總之

5、，針刺和艾灸均提高了CTX化療小鼠骨髓有核細胞第3天、第6天的PCNA蛋白表達的水平，促進了化療后骨髓有核細胞的增殖。 4.針灸對CTX化療小鼠骨髓有核細胞ki-67蛋白表達的影響：第3天，針刺組高于模型組，無顯著性差異，艾灸組高于模型組，有顯著性差異：第6天，與模型組比針刺組升高，無顯著性差異，與模型組比艾灸組升高，有顯著性差異； 針刺組和艾灸組的Ki-67蛋白表達水平比第3天有所降低。 結論： 1.研

6、究結果顯示，針刺和艾灸可以提升CTX小鼠骨髓有核細胞增殖性核抗原PCNA蛋白的表達水平，促進骨髓有核細胞的增殖，從而改善骨髓抑制，升高外周血白細胞。 2.針刺和艾灸提升了第3天和第6天CTX小鼠骨髓有核細胞Ki-67蛋白的表達水平。但是，第6天針刺組、艾灸組的Ki-67表達水平比第3天有所降低。 3.針灸保護CTX小鼠骨髓細胞，改善骨髓抑制，升高外周血白細胞的作用經過反復研究，結果表明其療效是確切的，本研究結果又為其治療