針灸對(duì)荷瘤小鼠化療后骨髓細(xì)胞DNA修復(fù)蛋白MGMT、POL-β的影響.pdf

1、目的:本課題采用S180荷瘤小鼠腹腔注射環(huán)磷酰胺(Cyclophosphamide,CTX)造成骨髓抑制模型,觀察第2天、4天、6天CTX荷瘤小鼠外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、骨髓細(xì)胞DNA修復(fù)蛋白MGMT、POL-β的表達(dá)量,通過(guò)對(duì)上述指標(biāo)的分析,探討針灸減輕化療不良反應(yīng),保護(hù)骨髓造血細(xì)胞,改善骨髓抑制與骨髓細(xì)胞DNA修復(fù)之間的相關(guān)性,從而揭示針灸改善化療致骨髓抑制,提升外周血白細(xì)胞的分子生物學(xué)機(jī)制,也為探索針灸在腫瘤相關(guān)疾病中的應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)室依

2、據(jù)。
　　方法:選用清潔級(jí),雄性,體重22±2g的昆明種(KM)小鼠96只,先用S180肉瘤細(xì)胞在小鼠的右腋下植瘤,5天后再根據(jù)體重把荷瘤小鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、針刺組、艾灸組。針刺組、艾灸組、模型組小鼠一次性腹腔注射CTX150mg/kg,即按照小鼠體重0.02ml/g用藥量CTX溶液濃度為7.5mg/ml,停藥后4h即造出模型[1]?？瞻捉M小鼠按照0.02ml/g劑量腹腔注射0.9％生理鹽水,時(shí)間與造模各組時(shí)間同步。造模結(jié)

3、束后4小時(shí)針刺組、艾灸組按造模時(shí)間順序進(jìn)行治療。選用“大椎”、“膈俞”、“腎俞”、“足三里”。模型組、空白組陪同抓取、固定。按治療時(shí)間的先后順序,在第2天、第4天、第6天治療后各隨機(jī)處死一批小鼠取材。分別用人工鏡檢檢測(cè)外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)骨髓細(xì)胞DNA修復(fù)蛋白MGMT、POL-β表達(dá)量。
　　結(jié)果:
　　1.針灸改善荷瘤小鼠化療后骨髓抑制,升高白細(xì)胞的療效確切。注射CTX的各組荷瘤小鼠從注射CTX后的第2

4、天白細(xì)胞就開(kāi)始下降,第3天模型組、針刺組、艾灸組白細(xì)胞計(jì)數(shù)降至最低,第4天開(kāi)始回升,第5天模型組、針刺組、艾灸組白細(xì)胞數(shù)均已超過(guò)基礎(chǔ)白細(xì)胞水平,且針刺組、艾灸組白細(xì)胞數(shù)高于模型組。第2天、第4天、第6天針刺組高于艾灸組,但無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　2.針刺和艾灸可以提高荷瘤小鼠化療后骨髓組織細(xì)胞MGMT蛋白的表達(dá)。第2天,模型組、針刺組、艾灸組骨髓細(xì)胞MGMT蛋白表達(dá)均高于空白組,針刺組與艾灸組低于模型組;第4天,針刺組

5、、艾灸組均高于模型組,且針刺組有顯著性差異(P<0.05),第6天,針刺組、艾灸組均高于模型組,均無(wú)顯著差異。針刺組與艾灸組比較,第2天、第4天MGMT蛋白的表達(dá)針刺優(yōu)于艾灸,第6天艾灸優(yōu)于針刺,但均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　3.針刺和艾灸可以提高荷瘤小鼠化療后骨髓組織細(xì)胞POL-β蛋白的表達(dá)。第2天、第4天、第6天針刺組、艾灸組荷瘤小鼠化療后骨髓細(xì)胞POL-β蛋白表達(dá)高于模型組,第4天有顯著性差異(P<0.05);第2

6、天,針刺組高于艾灸組,第4天、第6天低于艾灸組,均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.針灸改善荷瘤小鼠化療后骨髓抑制,升高白細(xì)胞的療效是確切的,針刺和艾灸兩種方法比較沒(méi)有顯著差異。
　　2.針灸提高了荷瘤小鼠環(huán)磷酰胺化療后骨髓細(xì)胞DNA直接修復(fù)蛋白MGMT的表達(dá),從而可以促進(jìn)受損骨髓細(xì)胞DNA的直接修復(fù),改善骨髓抑制。
　　3.針灸提高了荷瘤小鼠環(huán)磷酰胺化療后骨髓細(xì)胞DNA切除修復(fù)蛋白POL-β的