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文檔簡介
1、目的:通過觀察精元康膠囊對環(huán)磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)致骨髓抑制小鼠外周血中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白、血小板計數(shù)及骨髓有核細(xì)胞中p53蛋白含量的影響,探討精元康膠囊對化療藥物致骨髓抑制小鼠骨髓造血功能的影響及其作用機(jī)制,為精元康膠囊治療化療致骨髓抑制提供可靠的科學(xué)依據(jù)。
方法:選用清潔級健康雄性 BALB/C小鼠70只,鼠齡6~8w,體重18~22g,自由喂養(yǎng)3d后將小鼠稱重、編號,按隨機(jī)數(shù)字表法將小鼠
2、隨機(jī)分為7組:正常組、模型組、精元康膠囊高劑量組、精元康膠囊中劑量組、精元康膠囊低劑量組、貞芪扶正膠囊組、利可君片組。各組小鼠自由飲食喂養(yǎng)。各藥物組第1~3天每天上午按小鼠體重10ml/kg腹腔注射環(huán)磷酰胺生理鹽水溶液(10mg·ml-1),正常組小鼠按同樣的體積質(zhì)量分?jǐn)?shù)腹腔注射生理鹽水;正常組和模型組第1~7天每天下午按小鼠體重20ml·kg-1灌胃0.5%羧甲基纖維素鈉(Carboxymethyl cellulose sodium,
3、CMC-Na)溶液,各藥物組小鼠每天下午按同樣的體積質(zhì)量分?jǐn)?shù)灌胃相應(yīng)的藥物混懸液:精元康膠囊高、中、低劑量組小鼠分別灌胃4g·20ml-1、3g·20ml-1、2g·20ml-1的精元康混懸液,貞芪扶正膠囊組灌胃3g·20ml-1的貞芪扶正混懸液,利可君片組灌胃1.6g/L的利可君混懸液。末次給藥24h后行小鼠摘眼球取血,用全自動血細(xì)胞分析儀檢測小鼠外周血血常規(guī),記錄白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血小板、血紅蛋白的數(shù)量。將取過血的小鼠用頸椎脫臼法處死
4、,取右側(cè)股骨,用生理鹽水沖出骨髓細(xì)胞,制備骨髓單細(xì)胞懸液。將制備好的骨髓單細(xì)胞懸液離心后,取沉淀物,用預(yù)冷的磷酸鹽緩沖液(Phosphate buffered saline,PBS)洗滌1min×3次,在冰上向沉淀物中加入細(xì)胞裂解液將細(xì)胞全部裂解,用移液器將細(xì)胞碎片和裂解液移至離心管中,離心,取上清液,采用蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)測定小鼠骨髓有核細(xì)胞中p53蛋白的含量。
結(jié)果:①模型組小鼠外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞、
5、血紅蛋白及血小板數(shù)值較正常組明顯降低,各藥物組小鼠外周血白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白及血小板的數(shù)值較模型組明顯升高,但以精元康膠囊高劑量組的效果最為明顯,精元康中劑量組的效果次之,表明一定劑量的精元康膠囊能在一定程度上促進(jìn)化療后骨髓抑制小鼠骨髓造血功能的恢復(fù)。②模型組小鼠骨髓有核細(xì)胞中p53蛋白的含量較正常組明顯升高,各藥物組小鼠骨髓有核細(xì)胞中p53蛋白的含量較模型組均有一定程度的降低。各藥物組中精元康膠囊高劑量組小鼠骨髓有核細(xì)胞中p53蛋
6、白的含量低于其它各組,精元康中劑量組降低 p53蛋白含量的作用次之。本課題研究結(jié)果表明精元康膠囊灌胃給藥能促進(jìn)骨髓抑制小鼠骨髓造血功能的恢復(fù),降低骨髓抑制小鼠骨髓有核細(xì)胞中p53蛋白的含量,且其作用效果與藥物劑量呈正相關(guān)。
結(jié)論:精元康膠囊能明顯改善環(huán)磷酰胺所致小鼠骨髓抑制現(xiàn)象,顯著增加骨髓抑制小鼠外周血紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白及血小板數(shù),且能明顯降低小鼠骨髓有核細(xì)胞中促凋亡蛋白 p53蛋白的含量,證實精元康膠囊能夠改善化療所
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