針灸對(duì)CTX小鼠骨髓有核細(xì)胞DNA含量、細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡的影響.pdf

1、目的 本課題采用環(huán)磷酰胺(CTX)腹腔注射造成昆明種小鼠白細(xì)胞減少的模型，通過(guò)對(duì)外周白細(xì)胞計(jì)數(shù)、骨髓有核細(xì)胞DNA含量、各系細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡指數(shù)等指標(biāo)的檢測(cè)，進(jìn)而從分子生物學(xué)的層次來(lái)探討針刺、艾灸的方法對(duì)化療后小鼠造血功能的保護(hù)機(jī)理。 方法 把實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為模型組、針刺組、艾灸組、正常組。對(duì)模型組、針刺組、艾灸組小鼠通過(guò)腹腔注射環(huán)磷酰胺(CTX)100mg/kg/d，連續(xù)3天，第3天停藥后4小時(shí)即造出昆明種小

2、鼠的白細(xì)胞減少模型。正常組腹腔注射同體積生理鹽水，連續(xù)3天，按照造模時(shí)間的先后順序，在停藥后4小時(shí)模型即成。造模結(jié)束后4小時(shí)針刺組、艾灸組按造模順序進(jìn)行治療。選用穴位有“大椎”、“膈俞”、“腎俞”、“足三里”。針刺組用28號(hào)1寸針灸進(jìn)行針刺，進(jìn)針0.2～0.3mm，行平補(bǔ)平瀉，留針10mm，每日1次，連續(xù)5天；艾灸組用自制艾炷灸，每天1次，每次每穴4壯，連續(xù)5天。模型組、正常組陪同固定。模型組、針刺組、艾灸組中各組分2批，每批8只，在治

3、療的第52小時(shí)(第3天)、第100小時(shí)(第5天)，按治療時(shí)間的先后順序，分2批隨機(jī)處死小鼠取材。分別用自動(dòng)生化分析儀和流式細(xì)胞儀進(jìn)行外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)、骨髓有核細(xì)胞DNA含量、各系細(xì)胞周期、細(xì)胞凋亡指數(shù)等指標(biāo)的檢測(cè)。 結(jié)果 1對(duì)外周血白細(xì)胞的影響：在治療第3天、第5天后針刺組、艾灸組與模型組比較P<0.01和P<0.001，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有差異和顯著性差異；針刺組與艾灸組比較P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；說(shuō)明針刺組和艾灸組可以提高外周血

4、白細(xì)胞數(shù)量，并且艾灸組優(yōu)于針刺組。 2對(duì)骨髓有核細(xì)胞DNA含量的影響：通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果中DNA含量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)對(duì)比，顯示模型組顯著低于正常組(P<0.001)，說(shuō)明腹腔注射環(huán)磷酰胺可以造成小鼠骨髓有核細(xì)胞DNA含量水平的顯著下降；針刺組：艾灸組與模型組比較P<0.05和P<0.01，差別有顯著性意義；針刺組、艾灸組第3天與第5天比較P<0.05，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有意義，說(shuō)明針刺和艾灸治療均可以升高骨髓有核細(xì)胞的DNA含量，并且在一定的治療時(shí)

5、段內(nèi)隨著治療次數(shù)的增加效果會(huì)相應(yīng)增加；針刺組與艾灸組比較P<0.05，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有意義，說(shuō)明艾灸組在療效上要優(yōu)于針刺組。 3對(duì)骨髓有核細(xì)胞細(xì)胞周期的影響：對(duì)骨髓有核細(xì)胞G<,1>期的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)顯示，正常組與模型組比較P<0.001，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有極顯著性差異，說(shuō)明腹腔注射環(huán)磷酰胺可以造成小鼠骨髓有核細(xì)胞G<,1>期阻滯；針刺組、艾灸組與模型組比較P<0.05和P<0.01，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有差異和顯著性差異，說(shuō)明針刺組和艾灸組可以顯著

6、降低骨髓細(xì)胞G<,1>期的時(shí)相，并且艾灸組優(yōu)于針刺組；對(duì)G<,2>、S期的數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，針刺組、艾灸組與模型組比較P<0.01和P<0.001，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著性差異和極顯著性差異；針刺組與艾灸組比較P<0.05，兩組在統(tǒng)計(jì)學(xué)處理上有差異；說(shuō)明針刺組和艾灸組均可以顯著升高處于S期的骨髓細(xì)胞分裂水平，并且艾灸組優(yōu)于針刺組。 4對(duì)骨髓有核細(xì)胞凋亡的影響：在本次實(shí)驗(yàn)中雖然只有少量標(biāo)本測(cè)到了細(xì)胞的凋亡峰，但由于同批次實(shí)驗(yàn)小鼠骨髓中出現(xiàn)了凋亡調(diào)節(jié)