骨髓細(xì)胞移植治療小鼠急性肝損傷的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的： 觀察骨髓細(xì)胞移植對(duì)急性肝損傷小鼠肝臟的保護(hù)作用，以及移植的骨髓細(xì)胞在小鼠肝臟內(nèi)的轉(zhuǎn)歸。 方法： 建立小鼠CCL4急性肝損傷模型，24小時(shí)內(nèi)移植入同種異體小鼠全骨髓細(xì)胞，然后檢測(cè)移植后不同時(shí)間肝臟血清轉(zhuǎn)氨酶以及肝臟壞死面積的變化情況；采用免疫熒光雙標(biāo)方法檢測(cè)肝臟中的骨髓來(lái)源肝細(xì)胞；采用二步法灌注肝臟，消化分離出骨髓移植后2個(gè)月受體小鼠的肝臟細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng)，進(jìn)一步鑒定同時(shí)了解其生長(zhǎng)發(fā)育情況及細(xì)胞特性。

2、 結(jié)果： (1)急性肝損傷小鼠接受全骨髓細(xì)胞移植后96小時(shí)、7天和10天，血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT指標(biāo)較對(duì)照組有明顯降低；移植后72小時(shí)、96小時(shí)、7天和lO天，血清谷草轉(zhuǎn)氨酶AST指標(biāo)較對(duì)照組有明顯降低；移植后72小時(shí)和96小時(shí)肝臟壞死面積較對(duì)照組有明顯下降。 (2)急性肝損傷小鼠接受全骨髓移植后8周的觀察期內(nèi)： ①肝臟中始終存在移植骨髓來(lái)源的造血干細(xì)胞； ②骨髓移植1周后肝臟中開(kāi)始出現(xiàn)移植骨髓來(lái)源的表達(dá)

3、AFP的未成熟肝細(xì)胞； ③骨髓移植4周后開(kāi)始檢測(cè)到移植骨髓來(lái)源表達(dá)ALB的成熟肝細(xì)胞，而且此類肝細(xì)胞不表達(dá)造血干細(xì)胞標(biāo)記CD34。 (3)使用2-乙酰氨基芴能顯著提高移植骨髓來(lái)源未成熟肝細(xì)胞的數(shù)量，但是不能增加移植骨髓來(lái)源成熟肝細(xì)胞的數(shù)量。 (4)分離出的肝細(xì)胞中有部分是來(lái)源于移植骨髓的綠色熒光細(xì)胞，這些細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)貼壁后直徑平均為24.9±9.2um，能表達(dá)AFP，但不表達(dá)ALB、Desmin、CD16、C