溫陽(yáng)活血方抑制腎間質(zhì)纖維化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、腎間質(zhì)纖維化(Renalinterstitiumfibrosis，RIF)是各種腎臟疾病進(jìn)展至終末期的共同途徑，是多種原因引起的細(xì)胞外基質(zhì)成分在腎間質(zhì)內(nèi)過(guò)度沉積造成的。近年研究顯示腎功能受損與小管間質(zhì)損傷密切相關(guān)，其影響程度大于腎小球病變程度的影響。延緩其進(jìn)程將有利于腎功能的保護(hù)。 溫陽(yáng)活血方是臨床驗(yàn)之有效的一個(gè)復(fù)方，臨床證明溫陽(yáng)活血方對(duì)于防止腎小管間質(zhì)纖維化，保護(hù)腎功能起有益的作用，具有很好的應(yīng)用前景，單側(cè)輸尿管梗阻(Unil

2、ateralureteralobstruction，UUO)是以進(jìn)行性小管間質(zhì)纖維化為特征的實(shí)驗(yàn)性腎病模型，也是研究小管間質(zhì)纖維化常用的動(dòng)物模型。本試驗(yàn)采用溫陽(yáng)活血方對(duì)UUO小鼠進(jìn)行治療，以觀察其對(duì)腎小管標(biāo)志蛋白，腎臟組織中結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(connectivetissuegrowthfactor,CTGF)、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1(transforminggrowthfactor-β1,TGF-β1)、核因子-κB(nuclearfact

3、or-κB，NF-κB)表達(dá)的影響。 材料與方法:1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的選擇與分組雄性Wistar大鼠48只，體重為150-200克。隨機(jī)將40只行左側(cè)輸尿管結(jié)扎，再隨機(jī)分為UUO模型組8只、溫陽(yáng)活血治療組8只、桃仁治療組8只，肉蓯蓉治療組8只，蒙諾治療組8只；假手術(shù)組8只分離但不結(jié)扎輸尿管，各組予手術(shù)后24小時(shí)開(kāi)始灌胃給藥，假手術(shù)組和模型組予等量生理鹽水，于用藥14天后檢測(cè)指標(biāo)。 2、實(shí)驗(yàn)方法(1)ELISA法測(cè)尿β2-微球蛋

4、白(β2-microglobulin，β2-MG)、比濁法測(cè)尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)；(2)全自動(dòng)生化分析儀測(cè)血肌酐(bloodcreatinine，Scr)、尿素氮(bloodureanitroge，BUN)；(3)HE染色檢測(cè)常規(guī)病理；(4)免疫組織化學(xué)法觀察CTGF、TGF-β1、NF-κB在各組大鼠腎臟表達(dá)。 3、統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS13.0統(tǒng)

5、計(jì)軟件分析所得數(shù)據(jù)，各組數(shù)據(jù)以均數(shù)土標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組資料間比較采用單因素方差分析，LSD法多重比較組間差異。以P＜0.05判斷為差異具有顯著性。 結(jié)果與討論:1、各組大鼠腎功能測(cè)定結(jié)果UUO后第14天后，UUO模型組尿素氮水平與假手術(shù)組相比有顯著增高，溫陽(yáng)活血治療組、蒙諾治療組與UUO模型組相比有顯著降低。但各組肌酐水平無(wú)明顯差異。 2、各組大鼠腎小管標(biāo)志蛋白測(cè)定結(jié)果溫陽(yáng)活血治療組、蒙諾治療組、桃仁治療組和肉蓯蓉治療組均

6、能減少NAG水平，其中溫陽(yáng)活血治療組、桃仁治療組和蒙諾治療組效果更顯著。但僅有溫陽(yáng)活血方、蒙諾、桃仁可減少β2-MG水平，且溫陽(yáng)活血治療組和蒙諾治療組效果較桃仁更顯著。 3、大鼠單側(cè)輸尿管梗阻后腎小管間質(zhì)病理改變假手術(shù)組腎臟未見(jiàn)病理改變，模型組可見(jiàn)腎小管上皮細(xì)胞大量萎縮、空泡變性，皮質(zhì)和近髓萎縮腎小管較多，間質(zhì)內(nèi)大量炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，并出現(xiàn)間質(zhì)纖維化明顯。而蒙諾治療組、溫陽(yáng)活血治療組、桃仁治療組間質(zhì)內(nèi)炎細(xì)胞呈小灶性浸潤(rùn)，腎小管上皮細(xì)

7、胞變性萎縮和間質(zhì)纖維化范圍比UUO模型組輕。 4、腎小管間質(zhì)中NF-κB的表達(dá)與正常組相比較，在模型組、桃仁治療組、肉蓯蓉治療組、蒙諾治療組和溫陽(yáng)活血治療組，NF-κB表達(dá)均增加。NF-κB在溫陽(yáng)活血治療組、桃仁治療組和蒙諾組的表達(dá)與模型組相比較，有顯著降低。且溫陽(yáng)活血治療組、桃仁治療組和蒙諾治療組三者之間無(wú)明顯差異。 5、腎小管間質(zhì)中TGF-β1的表達(dá)正常腎組織幾乎不表達(dá)TGF-β1，模型組TGF-β1表達(dá)呈顯著性增多

8、。溫陽(yáng)活血治療組、桃仁治療組、肉蓯蓉治療組和蒙諾組與模型組相比較，均可降低TGF-β1的表達(dá)量；而且蒙諾治療組、溫陽(yáng)活血治療組表達(dá)量顯著低于桃仁治療組、肉蓯蓉治療組。 6、腎小管間質(zhì)中CTGF的表達(dá)與正常組相比較，造模各組CTGF表達(dá)呈顯著性增高。與模型組相比較，溫陽(yáng)活血治療組、桃仁治療組和蒙諾治療組的CTGF表達(dá)量均降低；溫陽(yáng)活血治療組、桃仁治療組與蒙諾組相比無(wú)顯著差異，但溫陽(yáng)活血治療組CTGF的表達(dá)水平較桃仁治療組顯著降低。