化學(xué)材料修飾紫杉醇的研究.pdf

1、紫杉醇(paclitaxel，商品名taxol)，是從紅豆杉科紅豆杉屬植物短葉紅豆杉(Taxusbrevifolia)的樹皮中提取分離得到的，是一個(gè)復(fù)雜的二萜類化合物。它具有誘導(dǎo)和促進(jìn)微管蛋白聚合抑制其解聚的作用，阻滯有絲分裂，抑制腫瘤細(xì)胞的分裂和增殖。對(duì)卵巢癌、乳腺癌、肺癌等多系統(tǒng)腫瘤都有良好的治療效果。但紫杉醇是脂溶性的，幾乎不溶于水，且半衰期短。目前使用的針劑采用聚氧乙烯蓖麻油(CremophorEL)和無水乙醇等體積混合穩(wěn)定助溶

2、，而CremophorEL有嚴(yán)重副作用，臨床使用不方便。本研究選用四種化學(xué)材料以不同方法修飾紫杉醇，以期增加紫杉醇的水溶性或制備紫杉醇的緩釋微球/微囊，實(shí)現(xiàn)免用CremophorEL或延長(zhǎng)紫杉醇在血漿中的半衰期的目的。 采用化學(xué)材料聚乳酸和乙醇酸的共聚物(poly(lactic-co-glycolicacid)，PLGA)和海藻酸鈉制備了PLGA-paclitaxel微球以及海藻酸鈉-paclitaxel微囊和微球，利用光學(xué)顯微

3、鏡和掃描電鏡對(duì)制備的微球和微囊進(jìn)行了形態(tài)學(xué)的觀察，用HPLC法測(cè)定紫杉醇在介質(zhì)中的釋放情況，用MTT法測(cè)定IC50，用荷瘤裸鼠實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)體內(nèi)抑瘤活性。采用化學(xué)合成的方法在紫杉醇的側(cè)鏈上連接親水性的聚乙二醇和乳糖，制備并純化出PEG化的mPEG-paclitaxel和兩種乳糖修飾的紫杉醇(TS1和TS2)，通過1HNMR以及紅外光譜對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，對(duì)其水溶性、熔點(diǎn)以及體內(nèi)外的抑瘤活性進(jìn)行了初步的評(píng)價(jià)，并對(duì)乳糖修飾的紫杉醇對(duì)腫瘤細(xì)胞周期

4、以及凋亡的影響進(jìn)行了檢測(cè)。 制備的海藻酸鈉-paclitaxel微囊/微球形態(tài)較好，呈規(guī)則圓形，粒徑均勻，平均粒徑256μm。冷凍干燥后呈不規(guī)則球形，顆粒長(zhǎng)徑約100μm，表面形成皺襞。海藻酸鈉-paclitaxel微囊載藥量在25％左右，而海藻酸鈉-paclitaxel微球不足10％。海藻酸鈉微球與微囊均具有緩釋作用，在體外均呈現(xiàn)明顯的兩相釋放特點(diǎn)，海藻酸鈉-paclitaxel微球在30天時(shí)可以緩慢釋放85％的藥物，體外實(shí)驗(yàn)

5、證明微囊/微球具有緩釋作用并保留了抑瘤活性。 PLGA-紫杉醇微球呈光滑球形，平均粒徑7-37μm，微球包封率在90％以上，載藥量為40％左右。PLGA-紫杉醇微球具有緩釋作用，在體外的釋放也呈現(xiàn)兩相釋放特點(diǎn)，其抑瘤活性與紫杉醇從微球內(nèi)的釋放密切相關(guān)，釋放充分并能維持較長(zhǎng)時(shí)間的有效藥物濃度，達(dá)到更好的抑瘤效果。 采用化學(xué)合成方法通過以琥珀酸酐作為架橋?qū)⒕垡叶己腿樘沁B接到紫杉醇的側(cè)鏈上，制備出PEG-紫杉醇和兩種乳糖修飾

6、的紫杉醇(TS1和TS2)，經(jīng)1HNMR以及紅外光譜對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行了結(jié)構(gòu)、熔點(diǎn)、水溶性的測(cè)定，并對(duì)其抑瘤活性進(jìn)行了評(píng)定。結(jié)果表明，連接聚乙二醇和乳糖后紫杉醇的水溶性增加，抑制腫瘤的活性沒有明顯的改變。連接上PEG后，PEG可以將更多的紫杉醇帶入腫瘤細(xì)胞內(nèi)更好的發(fā)揮細(xì)胞毒作用。在所選擇的五種細(xì)胞株中，TS1和TS2對(duì)肝癌細(xì)胞SMMC-7721的IC50值分別為82.8nM和348.2nM。TS1和TS2對(duì)腫瘤細(xì)胞周期有明顯的干擾作用，細(xì)胞阻滯