紫杉醇脂質(zhì)體注射劑研究.pdf

1、紫杉醇是從紅豆杉科紅豆屬(Taxus)植物中提取分離得到的一種含有一個紫杉烷環(huán)的雙萜類抗腫瘤藥物,通過獨(dú)特的微管抑制作用抑制細(xì)胞復(fù)制,阻止癌細(xì)胞增殖。由于其水中溶解度很低,市售制劑采用會引起過敏反應(yīng)的輔料Cremophor EL作為增溶劑提高其溶解度,給臨床帶來嚴(yán)重的安全性問題和不便。本課題對脂質(zhì)體作為紫杉醇的增溶系統(tǒng)進(jìn)行了初步研究,有望在保持原有制劑藥效的前提下提高其安全性。
　　 本文第一部分為紫杉醇脂質(zhì)體的處方和工藝研究。

2、首先建立了RP-HPLC法測定紫杉醇脂質(zhì)體中藥物含量,方法可靠。嘗試幾種常規(guī)脂質(zhì)體制備方法制備紫杉醇脂質(zhì)體后,選擇成膜水化-探頭超聲法小規(guī)模制備紫杉醇脂質(zhì)體,所得脂質(zhì)體平均粒徑小于100nm。以粒徑、載藥量為指標(biāo),單因素考察了脂質(zhì)體的制備過程并優(yōu)選了較佳工藝。以粒徑、載藥量為指標(biāo),對脂質(zhì)體處方進(jìn)行單因素考察,并使用析因設(shè)計(jì)優(yōu)化了紫杉醇脂質(zhì)體處方。在此基礎(chǔ)上,將成膜規(guī)模放大到60倍,初步探討了高壓均質(zhì)法大規(guī)模制備紫杉醇脂質(zhì)體的工藝條件,結(jié)

3、果表明壓力為15000psi時,5個循環(huán)可以制得粒徑小于100nm的紫杉醇脂質(zhì)體。最后篩選了9％蔗糖作為脂質(zhì)體凍干保護(hù)劑并確定初步凍干工藝。結(jié)果表明,本課題制備的紫杉醇脂質(zhì)體粒徑符合課題設(shè)計(jì)要求、載藥量較高,可以大規(guī)模制備。
　　 本文第二部分為紫杉醇脂質(zhì)體的理化性質(zhì)和初步穩(wěn)定性研究。按照中國藥典附錄脂質(zhì)體制劑要求,以超濾離心法結(jié)合RP-HPLC測定紫杉醇脂質(zhì)體包封率,方法可靠快捷。測得水化后紫杉醇脂質(zhì)體包封率大于99％。水化后

4、電鏡下脂質(zhì)體為小單室,粒徑分布不均勻。粒徑檢測結(jié)果表明水化后平均粒徑小于100nm,99％小于300nm,無大于1μm粒子。高壓均質(zhì)法制得脂質(zhì)體比超聲法更均勻。紫杉醇注射劑與5％葡萄糖注射劑配伍穩(wěn)定,24h內(nèi)粒徑與包封率均未發(fā)生明顯改變。紫杉醇脂質(zhì)體凍干品充氮絕氧密封后進(jìn)行穩(wěn)定性研究,影響因素試驗(yàn)表明,高溫、強(qiáng)光條件下粒徑變大,藥物含量下降,有關(guān)物質(zhì)增加,磷脂中過氧化物增加。提示紫杉醇脂質(zhì)體應(yīng)密閉低溫避光保存。加速3月試驗(yàn)表明脂質(zhì)體穩(wěn)定

5、性良好,4℃避光留樣已3月,穩(wěn)定性良好。
　　 本文第三部分為紫杉醇脂質(zhì)體大鼠體內(nèi)藥物動力學(xué)研究。首先建立RP-HPLC方法,以地西泮為內(nèi)標(biāo)測定大鼠血漿中紫杉醇的濃度。結(jié)果表明,紫杉醇制成脂質(zhì)體靜注后血中濃度下降趨勢與注射劑基本一致；各藥動學(xué)參數(shù)經(jīng)方差分析,消除速率常數(shù)t1/2β從2.49h延長到3.38h,體內(nèi)滯留時間MRT0～8h從1.96h延長到2.29h,均有顯著性差異(P<0.05),其他各參數(shù)均無顯著性差異(P>0.

6、05)。以市售Anzatax為參比制劑,紫杉醇脂質(zhì)體的生物利用度為88.13％。
　　 本文第四部分為紫杉醇脂質(zhì)體小鼠體內(nèi)組織分布研究。首先建立RP-HPLC方法,以地西泮為內(nèi)標(biāo)測定小鼠各臟器中紫杉醇的濃度,方法可靠靈敏。對各臟器8小時內(nèi)各時間點(diǎn)紫杉醇濃度數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析表明,紫杉醇包封進(jìn)入脂質(zhì)體后,肝和腎藥物濃度在5min時間點(diǎn)有顯著性提高(P<0.05),其他時間點(diǎn)大多無存在顯著性差異(P>0.05),且所有臟器中藥物濃度升

7、高最大不超過對照組的2倍。以梯形法計(jì)算各臟器紫杉醇蓄積,AUC數(shù)據(jù)表明,紫杉醇包封進(jìn)入脂質(zhì)體后,肝臟AUC0→8h僅僅提高34％,脾臟AUC0→8h提高6％,并未在肝脾臟器造成大量蓄積,但在子宮卵巢蓄積降低69％,而在心臟蓄積降低42％,從而初步保證了用藥安全。
　　 第五部分為紫杉醇脂質(zhì)體急性過敏反應(yīng)和最大耐受量試驗(yàn)。結(jié)果表明紫杉醇脂質(zhì)體的急性過敏反應(yīng)為0級,即無過敏反應(yīng)發(fā)生。單次給藥最大耐受量大于48mg·kg-1。與普通紫